环孢素a(csa)对体外培养人系膜细胞增殖的影响机制的研究

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1、分类号：密级：单位代码：10114学号：200920436环孢素A(CsA)对体外培养人系膜细胞增殖的影响机制的研究研究生：鲑蜢蛭指导教师：奎荣山数攮【}j清学位门类级别：医学硕士专业名称：凼抖堂研究方向：竖边篚丕全鲢基趟皇!匿瘗所在学院：第二临床医学院学位论文独创性声明本人声明，所呈交的学位论文系在导师指导下本人独立完成的研究成果。文中任何引用他人的成果，均已做出明确标注或得到许可。论文内容未包含法律意义上已属于他人的任何形式的研究成果，也不包含本人已用于其他学位申请的论文或成果。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确

2、的说明并表示谢意。本文如违反上述声明，愿意承担以下责任和后果：1、交回学校授予的学位证书；2、学校可在相关媒体上对作者本人的行为进行通报；3、本文按照学校规定的方式，对因不当取得学位给学校造成的名誉损害，进行公开道歉。fo日4、本人负责因论文成果不实产生的法律纠纷。论文作者签名：筮堕鱼日期：丝堡年』．_月学位论文版权使用授权书本人完全了解L“西医科大学有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留或向困家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅；本人授权山西医科大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采

3、用影印、缩印或其他复制手段保存论文和汇编本学位论文。本人离校后发表或使用学位论文或与该论文直接相关的学术论文或成果时，署名单位仍然为lII西医科大学。论文作者签名：塑逝盗指导麓窭爹一所同期：兰!坚年上月—坠同R期：——年——月——R有．未经许可，任何单位及任何个人不得擅自使用)目录中文摘要．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．⋯．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．⋯．I英文摘要．．．．．．⋯．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．⋯II缩略词表．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．

4、．．．．．．．．．．．．．．．III正文．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．1前言．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．⋯．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．1日IJ舌．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．⋯．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．1材料与方法⋯．．．．．．．．．．．．⋯．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．⋯2结果．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．⋯．⋯．．．．．⋯．．．．．．．．⋯12讨论．．．．．．．．．．．．．．

5、．．．．．．．．⋯．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．15结论．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．⋯．．．．．．⋯．．．⋯17综述．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．18参考文献．．．．．⋯．．．．．．．．．．．．⋯⋯．．⋯．．．．．．．．．．．．．．21个人简介．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．23致谢．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．．

6、．．．．．．24山西医科大学硕士学位论文环孢素A(CsA)对体外培养人系膜细胞增殖的影响机制的研究摘要目的1观察环孢素A(CsA)对人系膜细胞增殖、细胞周期的影响，及对细胞周期相关蛋白cyclinDl、cyclinE、p27bpl表达的影响；2初步探讨CsA对人系膜细胞增殖的影响机制。方法37℃恒温水浴箱中复苏冻存的系膜细胞，并将细胞移入50ml培养瓶中置于37℃、5％C0。培养箱中培养。当系膜细胞生长至80％贴壁时，传代并继续培养，传至3—4代后，细胞活力较强，用于实验。分实验组和对照组，实验组加入不同浓度CsA(O．1，1，59mol／L

7、)，对照组不加CsA处理。第一步实验：用MTT法在490nm波长处检测不同浓度的CsA分别作用24h、48h、72h后的吸光度值，观察药物对系膜细胞增殖抑制作用。第二步实验：不同浓度的CsA作用48h后，采用流式细胞仪检测细胞周期Go／Gl(DNA合成前期)与S(DNA合成期)的影响。第三步实验：不同浓度的CsA作用48h后，提取细胞蛋白，Westernblot法检测细胞中cyclinDl、cyclinE、p27bPl蛋白表达情况。结果1不同浓度CsA作用24h，48h，72h后，随着CsA浓度的增加及时间的延长，人系膜细胞的增殖抑制越来越明

8、显；与对照组相比，各浓度均有明显抑制作用，且不同药物浓度均以72h抑制作用最为明显，差异均具有统计学意义(P