天麻素对体外培养雪旺细胞增殖及其ngf表达的影响

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1、分类号R683.4学校代码10601密级公开编号Y1002105硕士学位论文天麻素对体外培养雪旺细胞增殖及其NGF表达的影响学科专业：外科学研究方向：骨创伤研究生姓名：付红运学号：1002105学位类型：科学学位导师姓名：王锐英教授二O一三年四月独创声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含未获得（注：如没有其他需要特别声明的，本栏可空）或其他教育机构的学位或证书使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已

2、在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名：签字日期：年月日----------------------------------------------------------------学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解桂林医学院有关保留、使用学位论文的规定，有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。本人授权桂林医学院可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同时授权中国学术期刊（光盘版）电子杂志社、中国科学技术信息研究所将本学位论文收

3、录到《中国优秀博硕士学位论文全文数据库》、《中国学位论文全文数据库》，并通过网络向社会公众提供信息服务。（保密的学位论文在解密后适用本授权书）学位论文作者签名：导师签字：签字日期：年月日签字日期：年月日目录天麻素对体外培养雪旺细胞增殖及其NGF表达的影响……………………1中文摘要………………………………………………………………………1ABSTRACT……………………………………………………………………3英汉缩略词对照表……………………………………………………………5前言……………………………………………………………………………61材料与方法…………………

4、………………………………………81.1试验材料与仪器…………………………………………………81.2主要实验试剂……………………………………………………………81.3试剂配制………………………………………………………………91.4实验方法………………………………………………………………101.4.1雪旺细胞原代培养…………………………………………………101.4.2S-100免疫组化鉴定…………………………………………………111.4.3MTT比色鉴定…………………………………………………………121.4.4雪旺细胞内NGF表达测定………………………………

5、……………131.4.5统计学分析…………………………………………………………142结果………………………………………………………………………152.1雪旺细胞形态学特征……………………………………………………152.2雪旺细胞S-100免疫组化检测鉴定……………………………………152.3MTT比色实验结果……………………………………………………162.4各组别雪旺细胞内NGF表达水平检测………………………………173讨论………………………………………………………………………203.1雪旺细胞在周围神经损伤中的意义……………………………………203.2

6、天麻素对神经的保护作用………………………………………………223.3实验设计的合理性………………………………………………………243.4实验结果讨论……………………………………………………………24I4结论………………………………………………………………………26参考文献………………………………………………………………………27综述……………………………………………………………………………31II天麻素对体外培养雪旺细胞增殖及其NGF表达的影响中文摘要目的：通过实验观察天麻素（Gastrodin）对体外培养雪旺细胞（SchwannCell,SCs）增殖及

7、NGF表达的影响。方法：取出生3-5天SD大鼠10只，解剖显微镜下无菌取出坐骨神经，剪碎后进行细胞培养，经过纯化后进行细胞传代培养，用S-100免疫组化鉴定雪旺细胞的纯度，然后分别用浓度为0.1mg/ml、0.05mg/ml、0.025mg/ml的天麻素血清+DMEM培养基进行培养，应用MTT观测雪旺细胞增长曲线，采用共焦激光扫描显微镜技术对传代雪旺细胞内NFG表达水平进行测定。结果：接种48h可看到贴壁生长的雪旺细胞，其胞核多为长形或圆形；胞体呈现立体感、饱满的梭形体，两端有细长的突起，周围有亮带。第5d起，细胞胞体开始肩并肩平行排列，自第10日，呈现

8、出“端端相对，极极相对”等网状或旋涡状规律排列，形如“地毯”。经过S100免疫组