ngf促进雪旺细胞增殖及其nf-kb表达上调的研究

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1、分类号R683.4学校代码10601密级公开编号1002101硕士学位论文NGF促进雪旺细胞增殖及其NF-KB表达上调的研究学科专业:外科学研究方向:骨创伤研究生姓名:古振林学号:Y1002101学位类型:科学学位导师姓名:唐际存教授二O一三年五月独创声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含未获得(注:如没有其他需要特别声明的,本栏可空)或其他教育机构的学位或证书使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究

2、所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名:签字日期:年月日----------------------------------------------------------------学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解桂林医学院有关保留、使用学位论文的规定,有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘,允许论文被查阅和借阅。本人授权桂林医学院可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同时授权中国学术期刊(光盘版)电子杂志社、中

3、国科学技术信息研究所将本学位论文收录到《中国优秀博硕士学位论文全文数据库》、《中国学位论文全文数据库》,并通过网络向社会公众提供信息服务。(保密的学位论文在解密后适用本授权书)学位论文作者签名:导师签字:签字日期:年月日签字日期:年月日1目录NGF促进雪旺细胞增殖及其NF-KB表达上调的研究…………………………1中文摘要………………………………………………………………………1ABSTRACT……………………………………………………………………3英汉缩略词对照表……………………………………………………………6前言……………………………………

4、………………………………………71材料与方法…………………………………………………………91.1实验动物取材……………………………………………………………91.2设备及器械………………………………………………………………91.3药物及试剂………………………………………………………………101.4溶液配制…………………………………………………………………111.5实验方法………………………………………………………………121.6MTT比色鉴定……………………………………………………………141.7统计学分析……………………………………………

5、…………………172结果………………………………………………………………………182.1体外培养的雪旺细胞形态特点……………………………………182.2体外培养的雪旺细胞形态特点……………………………………192.3MTT比色实验…………………………………………………………202.4不同实验组别雪旺细胞内NF-KB的表达水平比较………………212.5不同实验组别雪旺细胞内NF-KB-mRNA的表达……………………223讨论………………………………………………………………………243.1雪旺细胞体外培养…………………………………………………

6、243.2P75与NGF、NF-kB的关联性…………………………………………253.3NGF、P75与NF-KB的表达……………………………………………26I4结论………………………………………………………………………28参考文献………………………………………………………………………29综述……………………………………………………………………………34IINGF促进雪旺细胞增殖及其NF-KB表达上调的研究中文摘要目的:目前,相关研究发现NGF对雪旺细胞的增殖具有促进作用。同时,在雪旺细胞增殖的过程中发现有NF-KB的表达。现已明确NF-K

7、B的表达对细胞具有抗凋亡、促增殖的效果。本实验据此就NGF促进SCs的增殖及其与NF-KB的表达上调是否存在某种关系进行了研究.旨在为进一步明确雪旺细胞增殖的机制提供相关数据。方法:选择健康家兔十只,给予5%戊巴比妥钠(50mg/kg)麻醉,无菌条件下取出坐骨神经,分离培养出雪旺细胞,并进行S-100免疫细胞化学鉴定,5以鉴定细胞纯度,将细胞密度调整至1×10/ml后,接种到预涂有鼠尾胶的三个培养皿,分别计为实验组(加入40ng/ml的NGF);阻断组(加入40ng/ml的NGF和anti-NGFR);对照组(加入等量PBS)。置于37℃

8、含5%CO2的培养箱中培养5天,荧光显微镜下观察S-100荧光标记阳性细胞并计数,提取RNA及蛋白进行相关检测,每组应进行三次重复实验。然后进行统计学分析。结果:接种后的第24h开始,可以倒置

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