尼莫地平抑制大鼠烧伤后枯否细胞TNFα的产生

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1、尼莫地平抑制大鼠烧伤后枯否细胞TNFα的产生【关键词】烧伤尼莫地平枯否细胞肿瘤坏死因子【摘要】目的探讨钙离子通道阻断剂尼莫地平调控烧伤后枯否细胞（KC）合成释放TNFα的可能性，为寻找到一种有效减轻、控制烧伤后过度全身炎症反应的措施提供理论依据。方法内灌注消化、密度梯度离心法分离培养正常SD大鼠KC，显微荧光分光光度计复合倒置显微镜技术观察烫伤血清作用下单个KC细胞内钙（［Ca2+］i）变化，ELISA方法测定烫伤血清培养的KC上清中TNFα浓度变化;SD大鼠行30%TBSAⅢ度烫伤，

2、伤后6h分离KC，RNA酶保护分析法测定KCTNFαmRNA表达量，并测定血浆TNFα水平;观察尼莫地平存在时，上述结果的改变。结果与对照组相比，烧伤组KC［Ca2+］i峰值及培养上清中TNFα浓度增加值均显著增加（P<0.01），在1μM尼莫地平存在时，两者均显著减少（P<0.01）。烧伤后6hKCTNFαmRNA表达量及血浆TNFα水平显著升高，静脉给予尼莫地平（40μg?kg-1?h-1）后，两者均显著减少（P<0.01）。结论烧伤后，KC合成释放TNFα，通过细胞内钙离子通道信号传导途径实现。尼莫地平能抑制烧伤后KCTNFαmRN

3、A表达，使KC产生TNFα明显减少，并下调血浆中TNFα的总体水平。关键词烧伤尼莫地平枯否细胞肿瘤坏死因子αNimodipinecaninhibittheproductionofTNFαbykupffercellsinsevereburnedratsWangGuangyi，TianJianguang，ZhuShihui，etal.

4、">BurnDepartment，ChanghaiHospital，Shanghai200433.【Abstract】ObjectiveTostudywhethernimodipine，aDihydropyridine-typecalciumchannelblocker，caninhibittheproductionofTNFαbykupffercells（KC）anddown-regulateitslevelofplasmaaftersevereburninjury.MethodsK

5、Csofnormalratswereisolatedwithportalveincatheter，intrahepaticdigestionanddensitygradientcenˉtrifugation.Intracellularcalciumconcentration（［Ca2+］i）inindividualKCafterstimulatedwithpostburnserumwasasˉsessedfluorometricallywithmicrospectrofluorometer.LevelofTNFαinthesupernat

6、antofKCculturedwithpostburnserumwasdetectedbyELISA.SDratsunderwent30%TBSAfullthicknessburn.Sixhourslater，KCwereisolatedandtheirtotalRNAwasextracted.LevelofTNFαmRNAwasdetectedbyribonucleaseprotectionassay.LevelofplasmaTNFαwasalsodetected.Roleofnimodipineonabove-mentionedef

7、fectswereobserved.ResultsComparedwiththatofcontrolgroup，［Ca2+］iofKCandlevelofTNFαinsupernatantinburngroupincreasedsignificantly.Atpresentof1μMnimodipine，however，thenumericalvaluedecreasedsignificantly.Comparedwiththatofcontrolgroup，levelofKCmRNAandplasmaTNFαinburngroupals

8、oincreasedsignificantly.Afterintravenouslyinjectionwithnimodipine（40μg?kg-1?h-1），thenumericalval