白皮杉醇通过调控Nrf2抑制NLRP3炎性体激活减轻高糖诱导的足细胞损伤

白皮杉醇通过调控Nrf2抑制NLRP3炎性体激活减轻高糖诱导的足细胞损伤

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时间:2019-05-17

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1、学校代码10459学号或申请号20163034019密级硕士学位论文白皮杉醇通过调控Nrf2抑制NLRP3炎性体激活减轻高糖诱导的足细胞损伤作者姓名:姚重阳导师姓名:王振基副教授学科门类:医学专业名称:药学培养院系:药学院完成时间:2018年10月AthesissubmittedtoZhengzhouUniversityforthedegreeofMasterPiceatannolattenuateshighglucose-inducedpodocyteinjuryviaNrf2-mediatedinhib

2、itionofNLRP3inflammasomeactivationByChongyangYaoSupervisor:Prof.ZhenjiWangProfession:PharmacologySchoolofPharmaceuticalScienceOctober2018原创性声明本人郑重声明:所呈交的学位论文,是本人在导师的指导下,独立进行研究所取得的成果。除文中己经注明引用的内容外,本论文不包含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的科研成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体,均已在文

3、中以明确方式标明。本声明的法律责任由本人承担。学位论文作者袍日期:2018年10月24日学位论文使用授权声明本人在导师指导下完成的论文及相关的职务作品,知识产权归属郑州大学。根据郑州大学有关保留、使用学位论文的规定,同意学校保留或向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版,允许论文被查阅和借阅;本人授权郑州、大学可以将本学位论文的全部或部分编入有关数据库进行检索,可以采用影印缩印或者其他复制手段保存论文和汇编本学位论文。本人离校后发表、使用学位论文或与该学位论文直接相关的

4、学术论文或成果时一,第署名单位仍然为郑州大学。保密论文在解密后应遵守此规定。学位论文作者袍日期:2018年10月白皮杉醇通过调控Nrf2抑制NLRP3炎性体激活减轻高糖诱导的足细胞损伤摘要目的:本课题通过高糖诱导足细胞损伤建立糖尿病肾病的细胞模型,探讨白皮杉醇是否可以减轻高糖诱导的足细胞损伤,并初步探讨其分子作用机制,为新型治疗药物的开发提供理论依据。方法:在白皮杉醇对高糖条件下足细胞损伤的影响中,我们将小鼠足细胞的体外培养分成以下五组:正常糖(NG;5.6mMD-葡萄糖)组、高糖(HG;3

5、0mMD-葡萄糖)组、HG+白皮杉醇(5µM)干预组、HG+白皮杉醇(10µM)干预组及HG+白皮杉醇(20µM)干预组。采用CCK-8试剂盒、TUNEL细胞凋亡检测试剂盒、ELISA试剂盒和ROS检测试剂盒检测白皮杉醇对高糖条件下足细胞活性、凋亡、炎症反应和氧化应激的影响。在白皮杉醇减轻高糖条件下足细胞损伤的可能分子机制中,我们将小鼠足细胞的体外培养分成以下五组:正常糖(NG;5.6mMD-葡萄糖)组、高糖(HG;30mMD-葡萄糖)组、HG+白皮杉醇(20µM)干预组、HG+白皮杉醇(20µM)+sh-

6、NC组及HG+白皮杉醇(20µM)+sh-Nrf2组,采用实时荧光定量PCR检测转染后Nrf2基因表达情况,caspase1活性检测试剂盒检测caspase1的活性,免疫蛋白印迹法检测Nrf2、NLRP3、ASC和cleavedcaspase-1蛋白的表达水平。结果:1.CCK-8测定结果显示:与正常对照组相比,当白皮杉醇浓度在40和80µM时,小鼠足细胞的活力显著下降(P<0.05)。2.白皮杉醇可以在高糖条件下减少足细胞的凋亡,并以剂量依赖的方式增强足细胞活性(P<0.05)。3.与高糖组相比,白皮杉醇

7、可以明显降低IL-1β、IL-18、TNF-α和TGF-β1的水平(P<0.05)。4.白皮杉醇可以有效减少ROS的产生。5.白皮杉醇在高糖条件下促进足细胞Nrf2核转位。6.白皮杉醇通过促进Nrf2细胞核转位,抑制高糖诱导的足细胞NLRP3炎症小体激活。7.沉默Nrf2抑制白皮杉醇对高糖诱导足细胞I损伤的保护作用。结论:白皮杉醇通过促进Nrf2核转位和上调Nrf2表达来抑制高糖诱导的NLRP3炎症体激活,缓解高糖诱导的足细胞凋亡、炎症反应和氧化应激,并减轻高糖诱导的足细胞损伤。关键词:糖尿病肾病;小鼠足细

8、胞;白皮杉醇;Nrf2;NLRP3IIPiceatannolattenuateshighglucose-inducedpodocyteinjuryviaNrf2-mediatedinhibitionofNLRP3inflammasomeactivationAbstractObjective:WeestablishedaninvitromodelofDNbytreatingpodocytewithhighgluco

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