白藜芦醇抑制辐射诱导的nlrp3炎症蛋白复合体激活的机理研究

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1、中国医学科学院北京协和医学院博士研究生学位论文博士学位论文学校代码：10023学号：B2011016002白藜芦醇抑制辐射诱导的NLRP3炎症蛋白复合体激活的机理研究StudyontheMechanismofResveratrolInhibitingtheNLRP3InflammasomeActivationInducedbyRadiation所院：放射医学研究所姓名：付岳指导教师：樊飞跃研究员导师小组：刘强研究员王彦副研究员杜利清副研究员学科专业：放射医学学位类型：学术型研究方向：辐射损伤完成日期：2014年4月2日中国医学科学院北京协和医学院博士

2、研究生学位论文本论文的研究工作是在国家自然科学基金(课题编号：31170804，31240052)；天津市自然科学基金(课题编号：10JCZDJCl6900，11ZCGYSY02400，12JCYBJCl5300)；教育部高等学校博士学科点专项科研基金(课题编号：20101106110046．20121106120044)；中国医学科学院放射医学研究所学科发展基金(课题编号：1137，1247)的资助下完成的，在此表示诚挚的谢意!ThisstudywassupportedbyNationalNaturalScienceFoundationofChin

3、a(No．31170804，31240052)，theNaturalScienceFoundationofTianjin(No．10JCZDJCl6900，llZCGYSY02400，12JCYBJCl5300)，theScienceResearchFoundationforDoctor-SubjectofHighSchooloftheNationalEducationDepartment(No．20101106110046，20121106120044)andtheDevelopmentFoundationofInstituteofRadiatio

4、nofMedicine，ChineseAcademyofMedicalSciencesandPekingUnionMedicalCollege(No．1137，1247)．Wearegratefullyappreciatedforthesupport．中国医学科学院北京协和医学院博士研究生学位论文目录中文摘要⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．5Abstract⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯7前言⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

5、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．9第一章白藜芦醇抑制辐射诱导的IL-18表达研究⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯151．1实验材料⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯152．1．1细胞株⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．151．1．2主要试剂⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯151．1．3主要试剂缓冲液的配置⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．162．1．4细胞培养耗材⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯201．2．5主要仪器设备⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

6、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯201．2实验方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯211．2．2操作前准备⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯221．2．2细胞培养及实验分组⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．221．2．3酶联免疫吸附试验(ELISA)⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯231．2．4免疫印迹(WesternBlotting)检测IL-1B蛋白表达⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯241．2．5RT-PCR检测IL一2B的mRNA表达⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．261．2．6照射条件⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

7、⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯271．2．7统计学方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．271．3实验结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．281-3．1照射后MSCsIL．1B的分泌水平升高⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯281．3．2白藜芦醇对照射后MSCs胞外分泌

8、L-1B水平的影响⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯291．3．3白藜芦醇对照后MSCs细胞内IL．2B蛋白和mRNA水平的影响⋯⋯⋯⋯291．4讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯30第二章白藜芦醇抑制辐射诱导的NLRP

9、3炎症蛋白复合体激活的机理研究⋯⋯⋯⋯⋯一322．1实验材料⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯