欢迎来到天天文库
浏览记录
ID:12795246
大小:43.50 KB
页数:14页
时间:2018-07-19
《wilson病基因产物在人肝细胞内存在和定位的研究》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在教育资源-天天文库。
1、Wilson病基因产物在人肝细胞内存在和定位的研究中国神经精神疾病杂志2000年第4期第26卷论著与学术交流作者:侯国庆 梁秀龄 陈嵘 黄帆 徐评议 欧翠华 王莹 唐莉雯单位:侯国庆 梁秀龄 陈嵘 黄帆 徐评议 欧翠华 王莹(中山医科大学附属第一医院神经科510080);唐莉雯(DepartmentofPharmacology,UniversityofKentucky,KY40506)关键词:肝豆状核变性;P型ATP酶;铜;肝细胞 【摘要】 目的 证实Wilson病铜转运P型ATP酶(WD蛋白)在
2、人肝内的存在,并初步研究其在肝细胞内的具体定位。方法 应用Western-blot蛋白印迹技术对离体培养正常人肝细胞内蛋白进行分离;通过高浓度铜及P型ATP酶阻滞剂矾酸钠、激动剂长春新碱孵育培养,差速离心分离肝细胞胞浆、溶酶体、线粒体和微粒体,对各亚细胞铜含量分别对照分析。结果 人肝细胞内分离出155kDa的WD蛋白特异性条带;在人肝细胞质膜、微粒体内存在有铜转运P型ATP酶,其阻滞剂及激动剂对肝细胞铜转运有显著影响。结论 证实正常人肝细胞存在WD蛋白,其存在部分可能在肝细胞质膜、内质网和高尔基器。
3、ApreliminarystudyofpresenceandlocalizationoftheWilsondiseasegeneproductinhumanhepatocytesHuangFan HouGuoqing LiangXiuling ChenRong LiwenTang HuangFan XuPingyi OuCuihua WangYing (DepartmentofNeurology,TheFirstAffiliatedHospital,SunYat-senUniversityofMe
4、dicalSciences,Guangzhou.510080.Tel:020-87755766-8282) 【Abstract】Objective ToconfirmthepresenceandlocalizationofWilsondiseasegeneproduct-coppertransportingP-typeATPase(WDprotein)inhumanhepatocytes.MethodsHumanculturedhepatocyteswereincubatedandtheprote
5、inswereseparatedbySDS-PAGEandanalyzedbyWestern-blot.Mediaofcopper15μg/mLonly,copper15μg/mLwithvincristine(agonistofP-typeATPase)0.5μg/mL,orcopper15μg/mLwithsodiumvanadate(antagonistofP-typeATPase)18.39μg/mLofhepatocyteswereusedaccordingtogrouping.Micro
6、somes,lysosomes,mitochondria,andcytosolofhepatocyteswereisolatedbydifferentialcentrifugation.Theinfluenceoncoppertransportoftheseorganellesbysodiumvanadateandvincristinewascomparativelyanalyzedamongdifferentconditions.Results Aspecific155kDabandofWDpro
7、teinwasseparatedfromnormalhumanhepatocytes.CoppertransportingP-typeATPasewasfoundtobelocalizedinhumanhepatocyticplasmamembranesandmicrosomes,andsodiumvanadteandvincristinecanobviouslychangetheircoppertransporting.Conclusions WDproteinplaysanimportantro
8、leinhepatocyticcoppermetabolism.ItwasfirstdirectlyconfirmedthattherewereWDproteinsinnormalhumanliver,andthisproteinwasprobablysituatedathepatocyticplasmamembranes,Golgiapparatusandendoplasmicreticulum.DysfunctionofWDproteinmightbethemos
此文档下载收益归作者所有