沙枣黄酮的提取及其抗氧化作用的研究的论文

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1、沙枣黄酮的提取及其抗氧化作用的研究的论文作者：李红，郅洁，马彦梅，李炳奇，刘红，龚晓武【摘要】目的对沙枣黄酮的抗氧化作用进行研究。方法以70%乙醇为溶剂，超声辅助法提取沙枣中的黄酮，用比色法测定其含量为0.928%；采用比色法测定沙枣黄酮对·oh、o-2·和dpph·等3种自由基的清除作用。结果沙枣黄酮对3种自由基都有明显的清除作用，清除能力为dpph·>o-2·>·oh。结论清除率与浓度存在明显的量效关系，当浓度为0.4mg·ml-1时，其清除率·oh为76.07%，o-2·为79.53%，dpph·为93.91%。【关键词】沙枣；黄酮；抗氧化性沙枣elae

2、agnusangustifolial.t属胡颓子科(elaeagnaceae)胡颓子属(elaeaglltl.)，耐盐碱、生长快、易繁殖，药用价值高，在新疆的塔克拉玛干沙漠及各河流沿岸(且末、若羌、民丰、英吉沙、阿克苏)和伊犁、托克逊等地广泛分布［1］。酮类化合物具有抗癌、抗肿瘤、抗心脑血管疾病、抗炎镇痛、免疫调节、降血糖、治疗骨质疏松、抑菌抗病毒、抗氧化、抗衰老、抗辐射等作用［2,3］。.近年来，世界上掀起了植物药开发的热潮，植物药以其天然低毒的特点倍受青睐，而黄酮类化合物以其广谱的药理作用引人瞩目。但是关于沙枣黄酮抗氧化方面的研究尚未见报道。本研究将沙枣黄酮对3种不同

3、自由基的清除能力进行了一个较为全面、系统的研究，从而探讨沙枣黄酮的抗氧化作用，为进一步筛选天然植物抗氧化剂奠定了一定的基础。　　1材料　　1.1试剂乙醇(a.r)，氢氧化钠(a.r)，亚硝酸钠(a.r)，硝酸铝(a.r)，ph8.2tris-hcl缓冲液(a.r)，0.02%双氧水(a.r)；7mmol·l-1邻苯三酚(a.r)；ph7.4磷酸盐缓冲溶液（pbs,a.r)；1.5mmol·l-1邻二氮菲(a.r)；2×10-4mol·l-1的dpph（二苯基苦基苯肼,sigma公司生产）。　　1.2仪器tdl-5型低速台式离心机（上海隆拓仪器设备有限公司）；赛多利斯电子天

4、平（德国sartorius）；岛津uv-2401pc型紫外分光光度计（日本岛津公司生产）；r-200型旋转薄膜蒸发器（瑞士buchi）；eppendorf手动可调程单道移液器（德国艾本德股份公司）；dl-360a型超声波清洗器（上海之信仪器有限公司）；shz-c型循环水真空泵（河南豫华仪器有限公司）；hh-s型恒温水浴锅（陕西太康生物科技有限公司）。　　2方法　　2.1黄酮的含量测定方法　　2.1.1对照品溶液的制备精密称取芦丁标准品适量，用甲醇溶解，定容于50ml容量瓶中，制得浓度为0.2mg·ml-1的对照品溶液。　　2.1.2最大吸收峰的确定精确吸取芦丁对照品溶液2

5、ml,加5%亚硝酸钠溶液0.3ml，摇匀后静置6min，加10%硝酸铝溶液0.3ml，摇匀后静置6min，加10%氢氧化钠溶液4.0ml，用蒸馏水定容至10ml，摇匀，放置15min，于400～600nm波长处扫描，结果在510nm处有最大吸收。　　2.1.3标准曲线的绘制精确吸取0.20mg·ml-1芦丁对照品溶液0.0，1.0，2.0，3.0，4.0，5.0ml，分别加入5%亚硝酸钠溶液0.3ml摇匀，放置6min，再加入10%硝酸铝溶液0.3ml摇匀，放置6min，最后加入10%氢氧化钠溶液4.0ml，用蒸馏水定容至10ml，摇匀，放置15min，在510nm处测定

6、其吸光度值。以吸收度为纵坐标，对照品溶液的浓度（mg·ml-1）为横坐标，得线性回归方程：y=9.735x-0.0115，r=0.9999。　　2.1.4黄酮的提取准确称取粉末30.00g，按料液比1∶10加入70%乙醇浸泡30min，超声提取1h，过滤后得滤液和滤渣。滤渣再按上述方法提取2次，浓缩，定溶至50ml容量瓶，作为试样液。　　2.1.5黄酮的含量测定取试样液2ml于10ml容量瓶中，加入5%亚硝酸钠溶液0.3ml，摇匀，放置6min；再加入10%硝酸铝溶液0.3ml，摇匀，放置6min；最后加入10%氢氧化钠溶液4.0ml，用蒸馏水定容至10ml，摇匀，放置1

7、5min；在510nm处测定其吸光度值。根据标准曲线计算得沙枣果肉黄酮含量为0.928%。　　2.2自由基的生成及清除率的测定　　2.2.1羟自由基的生成及清除率的测定［4］精密量取2.0mlpbs磷酸盐缓冲溶液(ph=7.4，下同)和4.0ml蒸馏水于试管中，混匀作空白参比管；精密量取2.0mlpbs，1.0ml邻二氮菲(1.5mmol·l-1，下同)、1.0mlfeso4(1.5mmol·l-1，下同)和2.0ml蒸馏水于试管中，混匀作未损伤管；精密量取2.0mlpbs，1.0ml邻二氮菲，1.0mlfeso4，1.0ml