铁苋菜总黄酮的提取纯化及其抗氧化活性的研究

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1、CIassifiedIndex：R285．5U．D．C：SouthwestUniversityofScienceandTechnoIogy3CIMasterDegreeThesiSExtractionandAntiOXidativeActiVitiesofTotaIFIavonoidsfromAca／yphaAustra

2、iasL．Grade：2011Candjdate：AcademiCDegreeAppIiedfor：MasterSpeciaIity：BotanySupervisor：Apr．4，2014独创性声明本人声明所呈交的论文是

3、我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得西南科技大学或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。签名：崔阴鲡日期：2_o／q,6哆关于论文使用和授权的说明本人完全了解西南科技大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留学位论文的复印件，允许该论文被查阅和借阅；学校可以公布该论文的全部或部分内容，可以采用影印、缩印或其他复制手段保存论文。(保密

4、的学位论文在解密后应遵守此规定)签名：崔鲷绚新虢穆彳蟛怫∥／钽厂。弓西南科技大学硕士研究生学位论文第1页摘要铁苋菜(AcalyphaaustralisL．)是一种在我国分布广泛的大戟科一年生草本植物，是民间常用的药材，具清热解毒、止血、止痢等功效，其药用价值和低廉的原料来源成本，具有一定的开发利用优势。随着提取工艺和药理活性不断研究深入，铁苋菜资源得到了一定的开发利用，在中药市场占有一席之地，但是对铁苋菜的活性成分和药理作用的研究仍处于基础阶段。研究以铁苋菜全草为研究对象，研究铁苋菜总黄酮的碱提、醇提和微波辅助提取工艺，确定各提取工艺的最

5、佳参数。通过乙酸乙酯、正丁醇的萃取得到铁苋菜黄酮的4个不同的组分，分别研究各个组分铁苋菜黄酮的含量及各部位的体外抗氧化活性，得出乙酸乙酯部位的铁苋菜黄酮有较强体外抗氧化活性。通过建立D．半乳糖小鼠衰老模型，进一步研究其体内抗氧化活性。主要研究内容和结果如下：1以铁苋菜总黄酮得率为指标，通过单因素实验和正交实验优化，得出超声辅助碱溶酸沉法提取铁苋菜总黄酮的最佳工艺为：料液比1：20，碱性提取液pHl1，温度60℃，酸沉pH2．5，超声提取时间90min；有机溶剂乙醇提取铁苋菜总黄酮的最优工艺为：料液比1：50，乙醇体积浓度为50％，时间2h

6、，提取温度70℃；微波辅助乙醇提取铁苋菜黄酮的最优工艺参数为：料液比1：40，乙醇体积浓度为50％，微波萃取3min，提取功率为280W。2经过有机溶剂的液．液萃取，得到不同极性部位的黄酮，并考查聚酰胺树脂对乙酸乙酯相铁苋菜黄酮的吸附特性。静态吸附实验表明，当铁苋菜黄酮的吸附pH为4，上样液浓度为1．25mg／mL时，有较好的吸附率和解吸率，由静态动力学过程考查得出，聚酰胺树脂吸附铁苋菜黄酮的类型为快速吸附型，聚酰胺树脂能在60min之内达到吸附平衡。通过Langmuir方程拟合吸附等温方程，具较好拟合度，Langmuir：Ce／q。=0

7、．0349C。+0．023(R2=0．925)。当上柱液流速为1．5mL／min，上柱液体积为30mL时，聚酰胺树脂对铁苋菜黄酮达到吸附饱和，最佳洗脱剂浓度为30％。3以VC为阳性对照，建立不同的化学反应体系，分别检测铁苋菜不同西南科技大学硕士研究生学位论文第2页极性部位黄酮的总还原力，以及清除二苯代苦味酰基苯肼自由基(DPPH．)，超氧阴离子自由基(02’．)和羟基自由基(．OH)的作用大小。结果表明，铁苋菜不同极性部位黄酮在各反应体系中还原力和清除作用均有不同，乙酸乙酯部位和正丁醇部位具有良好的抗氧化作用，还原力分别达到O．726和0

8、．644，超过抗坏血酸，其中乙酸乙酯对DPPH．和．OH的清除作用达到81．83％和88．83％，大于抗坏血酸，而醇提物和极性较大水相的最大还原力和自由基清除作用与抗坏血酸相比，表现出较低的抗氧化能力。4选取体外抗氧化活性较高的乙酸乙酯相的铁苋菜黄酮作为体内抗氧化活性的研究对象，考查乙酸乙酯相中的铁苋菜黄酮对D型半乳糖致昆明小鼠衰老的活性作用，试验过程中，定期称量小鼠体重，并检测小鼠血清、心、肝、肾中丙二醛(MDA)的含量，以及超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH．Px)和过氧化氢酶(CAT)的活性，结果表明，与阴性对照组

9、相比，铁苋菜黄酮高剂量组A(HighF)组小鼠脏器中MDA含量显著性减少(p<0．05)，与阴性对照组相比，HighFA组小鼠脏器中SOD、GSH．Px和CAT的活性显著性提高(p<0．05)