旱莲草总黄酮的提取及其体外抗氧化活性研究论文

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1、旱莲草总黄酮的提取及其体外抗氧化活性研究论文王雪梅张建胜戴云高云涛【摘要】目的研究旱莲草总黄酮的提取及其抗氧化活性。方法利用Fentaon反应产生羟自由基·OH,光照核黄素产生超氧阴离子自由基O-2·,采用分光光度法研究旱莲草体外清除活性氧自由基的作用,用硫代巴比妥酸(TBA)分光光度法研究其对·OH诱发卵磷脂脂质过氧化和DNA氧化损伤的抑制作用。结果旱莲草总黄酮得率为3.96%,对·OH、O-2·的半清除率IC50为0.015mg·ml-1,0.08mg·ml-1;对脂质过氧化DNA氧化损伤的半抑制率为0.02mg·ml-1,2.0μg·ml-1。结论旱莲草总黄酮

2、能有效清除活性氧自由基,对卵磷脂脂质过氧化和DNA氧化损伤有显著抑制作用。【关键词】旱莲草;总黄酮;抗氧化Abstract:ObjectiveTostudytheextractionofflavonefromEcliptaalbaanditsantioxidationfunction.MethodsScavengingeffectsofEcliptaalbaonactiveoxygenspecies·OHandO·-2generatedbyFentonreactionandriboflavinephotosensitizationeansofspectrophoto

3、metry.TheinhibitoryeffectsofEcliptaalbaonthelecithinlipidperoxidationanddamageofDNAchaininducedbyhydroxylradicaletry.ResultsTotalflavonoidsinEcliptaalbai-clearancerateof·OHandO·-2g·ml-1and0.08mg·ml-1;thesemi-inhibitionrateofLecithinlipidperoxidationandoxidationdamageofDNAg·ml-1and2.0μg

4、·ml-1.ConclusionEcliptaalbacanscavengeactiveoxygenefficiently.ItcanalsosignificantlyinhibitlipidperoxidationanddamageofDNAbyhydroxylradical.KeyBase公司),番红花红(SafranineT),蛋氨酸,鲱鱼精DNA(购至sigma公司),2-硫代巴比妥酸(TBA),三氯乙酸(TCA),无水乙醇,亚硝酸钠,硝酸铝,氢氧化钠,石油醚,所用试剂均为分析纯,实验用水为二次蒸馏水。9200型紫外可见分光光度计(北京瑞利分析仪器公司),数

5、显恒温水浴锅,低温超速离心机,光照箱(自制,35cm×30cm×25cm,光源为纯稀土节能灯,灯功率45DA)类似物反应生成粉红色物质,该物质在532nm处有最大光吸收,采用TBA反应可定量检测卵磷脂被氧化损伤时产生MDA的量,加入抗氧化物质可间接测出卵磷脂被氧化损伤的抑制率。旱莲草总黄酮对脂质过氧化的抑制作用见图3。由图3可知,旱莲草总黄酮对脂质过氧化的半抑制率为IC50=0.02mg·ml-1,当总黄酮质量浓度为0.12mg·ml-1时,抑制率达到73.4%,随后,抑制率趋于平稳。图3对脂质过氧化的抑制作用(略)3.5对·OH引发DNA损伤的抑制作用采用TBA反

6、应可定量检测脱氧核糖或DNA上脱氧核糖环的受·OH攻击氧化断裂产生的丙二醛类似物[12]。旱莲草总黄酮对·OH引发DNA损伤的抑制作用见图4。由图4可知,加入样品后,DNA氧化损伤被抑制,抑制率随着浓度的增加而增大,旱莲草总黄酮对·OH引发DNA损伤的半抑制率为IC50=2.0μg·ml-1,当质量浓度为3μg·ml-1时抑制率达到87.8%。相同条件下测得芦丁的IC50=0.1mg·ml-1,说明旱莲草总黄酮对·OH引发DNA损伤的抑制作用优于芦丁。图4对·OH引发DNA损伤的抑制作用(略)4讨论旱莲草含有芹菜素(apigenin)、木樨草素(luteolin)、

7、槲皮素(quercetin)以及芹菜素-7-氧-葡萄糖苷(apigenin-7-O-glucoside)和木樨草素-7-氧-葡萄糖苷(luteolin-7-O-glucoside)等黄酮类化合物[13]。研究表明,含酚羟基的化合物具有明显的清除氧自由基的作用,这种清除氧自由基的能力来自于酚羟基的供氢或供电子能力[14]。本实验结果证实旱莲草中黄酮类物质有很好的清除氧自由基作用,并且能有效抑制MDA生成,具有很好的抗脂质过氧化及保护DNA免受自由基氧化损伤的能力,为旱莲草的药理研究提供一些理论上的依据。【

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