麒麟尾总黄酮提取及其抗氧化作用研究

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1、麒麟尾总黄酮提取及其抗氧化作用研究　　摘要：利用单因素试验及正交试验法考察麒麟尾（Epipremnumpinnatum）总黄酮提取的最佳工艺，并通过测定总黄酮对羟基自由基（?OH）和2，2-二（4-叔辛基）-1-苦肼基自由基（DPPH?）的清除作用研究其抗氧化性。结果表明，麒麟尾总黄酮提取的最佳工艺条件为超声时间35min、超声温度90℃、料液比1∶15（g∶mL）、乙醇体积分数85%，在此条件下总黄酮得率为3.04%；抗氧化试验结果表明，麒麟尾总黄酮具有较强的抗氧化活性，对?OH和DPPH?自由基

2、的IC50分别为2.355和0.143mg/mL。　　关键词：麒麟尾（Epipremnumpinnatum）；总黄酮；提取工艺；抗氧化活性　　中图分类号：S567.7+9；R284.2文献标识码：A文章编号：0439-8114（2016）18-4783-04　　DOI：10.14088/j.cnki.issn0439-8114.2016.18.037　　黄酮类化合物广泛存在天然植物中，其具有多方面的药理活性，如可以改善糖和脂代谢从而起到降血糖[1]、降血脂[2]的作用，还可以通过改善循环系统起到保护

3、心肌[3]、降血压[4]和抗心律失常[5]等作用，其他药理作用还有保护肝脏[6]、镇痛抗炎[7]、抗血栓[8]、抗氧化[9]和抗肿瘤[10]等。因此，研究和开发植物总黄酮成分和药理活性具有重要意义。麒麟尾（Epipremnum8pinnatum）药性平、味苦、微辛，具有敛疮排脓、舒筋活血、消肿止痛、清热解毒等功效，主要用于感冒发热、鼻衄、目赤肿痛、百日咳、跌打损伤、骨折、风湿痹痛、痰火瘰疬、痈疖、毒蛇咬伤等[11，12]。目前，对麒麟尾的研究主要集中在园林景观、资源分布和抗癌活性等[13-16]。基

4、于麒麟尾有着良好的民间药用基础，而其药理活性和化学成分的研究甚少，对总黄酮提取工艺和抗氧化活性的研究鲜见报道。本试验以单因素试验及正交试验法考察麒麟尾总黄酮的提取工艺，并探讨其总黄酮的抗氧化作用。旨在为深入研究和开发麒麟尾植物资源提供理论依据。　　1材料与方法　　1.1材料　　麒麟尾采自广西宜州市郊区，经河池学院邓晰朝副教授鉴定为天南星科麒麟叶属麒麟尾。芦丁标准品由河池学院化学与生物工程学院制药工程实验室提供，经HPLC检测，芦丁含量>99%；DPPH由美国Sigma公司提供，其余试剂均为国产分析纯

5、。　　主要仪器设备：紫外可见分光光度计（美国Agilent公司）；电子分析天平（梅特勒-托利多仪器有限公司）；电子恒温水浴锅（北京泰克仪器有限公司）。　　1.2方法　　1.2.1标准曲线绘制配置芦丁标准品溶液（含芦丁0.20mg/mL），精密吸取芦丁标准品溶液0（空白）、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0mL于10mL容量瓶中，分别加入6、5、4、3、2、1mL70%乙醇，吸取0.3mL亚硝酸钠溶液（5%）加入容量瓶，轻轻摇匀，室温静置10min，吸取0.38mL三氯化铝溶液（10%）加

6、入容量瓶，轻轻摇匀，室温静置10min，吸取2mL氢氧化钠（1mol/L）溶液加入容量瓶后用70%乙醇定容至刻度，轻轻摇匀，室温静置10min后测定吸光度（图1），得回归方程为y=0.4025x+0.0022（r2=0.9991）。　　1.2.2总黄酮含量测定流程麒麟尾洗净沥干→60℃下烘干→粉碎，过40目筛→称取1.00g→不同超声时间、超声温度、料液比和乙醇体积分数进行提取→过滤，收集滤液→用无水乙醇定容至50mL→移取1mL→按“1.2.1”的方法测定吸光度→从回归方程算得总黄酮含量→根据称取

7、的样品量、稀释倍数计算样品中总黄酮的得率。　　1.2.3正交试验先对麒麟尾总黄酮得率影响较大的超声时间、超声温度、料液比（g∶mL，下同）、乙醇体积分数进行单因素试验。在单因素试验的基础上，进行正交试验，因素与水平见表1。　　1.2.4总黄酮对?OH清除能力测定在邻二氮菲-金属铁离子-H2O2为反应体系下进行试验。具体操作如下：取1.5、2.0、2.5、3.0、3.5mg/mL5个不同浓度的麒麟尾总黄酮溶液于刻度试管中，分别加入0.5mLFeSO4（7.5mmol/L）、0.75mL邻二氮菲（5.0

8、mmol/L）。再加入0.5mL双氧水（0.1%）后，用蒸馏水稀释至5mL刻度，把试管放入37℃水浴恒温60min，用紫外分光光度仪测定吸光度A1（536nm），并设立空白组A2（蒸馏水代替样品）和样底组A0（蒸馏水代替双氧水），重复3次，求平均值，以维生素C作为对照。清除?OH自由基计算公式：　　清除率=（1-■）×100%　　1.2.5总黄酮对DPPH?自由基清除能力测定8取0.1、0.2、0.3、0.4、0.5mg/mL5个不同浓度的麒麟尾黄酮溶液0.5mL于刻