人胎盘与脐动、静脉血造血干-祖细胞归巢相关黏附分子表达的研究

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1、人胎盘与脐动、静脉血造血干/祖细胞归巢相关黏附分子表达的研究作者：苏蕊，陈代雄，方宁，陈琦，龚芳泽【摘要】为了评价人胎盘组织造血干/祖细胞（hematopoieticstem/progenitorcell，HSPC）的归巢能力，采用机械法制备人胎盘组织单个细胞悬液，用流式细胞术分析胎盘组织及脐动、静脉血有核细胞中CD34+细胞及其亚群的含量，检测三者来源的CD34+细胞表面归巢相关黏附分子CD44、CD11a、CD62L、CD49d、CD49e和CD54的表达水平。结果显示，胎盘组织CD34+细胞及CD34+CD38-细胞百分

2、率明显高于脐动、静脉血；脐动脉与脐静脉血中HSPC百分率没有明显差异。胎盘来源CD34+细胞高度表达黏附分子CD11a、CD49d、CD44、CD49e及CD54，其中表达CD49e及CD54水平明显高于脐动、静脉血CD34+细胞。胎盘来源的CD34+CD62L+细胞百分率为(64.58±15.52)%，低于脐静脉血来源的表达。结论：人胎盘富含HSPC。胎盘来源的CD34+细胞多数黏附分子的表达水平近似或高于脐血，提示胎盘HSPC的归巢能力有可能强于脐带血。【关键词】胎盘　　ExpressionsofHoming-Relate

3、dAdhesionMoleculesinHemato-poieticStem/ProgenitorCellsDerivedfromHumanPlacenta，UmbilicalCordArterialandVenousBlood　　AbstractTheaimofthisstudyingcapabilitiesofhematopoieticstem/progenitorcells(HSPCs)derivedfromhumanplacentatissues(PT).SinglecellsuspensionofhumanPTech

4、anicalmethod.Theexpressionlevelsofhoming-relatedadhesionmolecules(HRAM)includingCD11a，CD49d，CD44，CD49e，CD62LandCD54onCD34+cellsandthepercentagesofCD34+cellsandthEirsubpopulationsinnucleatedcells(NC)fromfreshhumanPT，umbilicalcordarterialblood(UCAB)andumbilicalcordven

5、ousblood(UCVB)etry.TheresultsshoonganplacentaisrichinHSPC.Moreover，theexpressionlevelsofmostHRAMinCD34+cellsfromPTarehigherthanthosefromUCABandUCVBorareclosetothem.ItsuggestedthatHSPCsderivedfromPTmighthavestrongerhomingcapabilitiesthanthosefromUCB.　　Keybilicalcorda

6、rtery;umbilicalcordvEIn;hematopoieticstem/progenitorcell;adhesionmolecule;homing自发现脐带血富含造血干/祖细胞（hematopoieticstem/progenitorcell，HSPC）以来，脐血HSPC的移植已成为治疗骨髓造血功能衰竭、恶性血液病、重症免疫缺陷、某些遗传病等疾病的重要手段［1-4］。但是，单份脐血所含的HSPC数量难以使一个成人获得造血干细胞重建。因此，寻找富含HSPC的新资源是非常必要的，国内已有学者发现胎盘组织中含有比脐带血

7、更丰富的HSPC［5］。作为HSPC的成　　功移植，除要有足够数量的HSPC外，还要求HSPC能及时、高效地归巢至骨髓造血微环境“龛”，这对HSPC的植活与造血重建具有决定意义［6］。HSPC表面黏附分子的正常表达是干细胞移植时HSPC实现归巢及成功植入的关键。本研究中，我们利用了胎儿胎盘血循环的特点，即脐动脉血是由胎儿流到胎盘，而脐静脉血则是由胎盘流回胎儿，分别测定脐动、静脉血及胎盘组织中HSPC的含量及三者CD34+细胞表面黏附分子的表达，初步探讨了胎盘HSPC的归巢能力，以期为人胎盘HSPC最终应用于临床移植提供有价值的

8、实验依据。　　材料和方法　　主要试剂　　荧光标记的CD分子系列单克隆抗体，anti-humanCD34Cy-chrome购自美国PharMingen公司。FITC标记的CD38单克隆抗体、CD49d单克隆抗体和CD54单克隆抗体及PE标记的CD11a单克隆抗体均购自晶美公司，