新疆哈密瓜病毒的das-elisa检测和分子鉴定

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1、园艺学报，2016，43(6)：1107–1116.ActaHorticulturaeSinicadoi：10.16420/j.issn.0513-353x.2016-0144；http：//www.ahs.ac.cn1107新疆哈密瓜病毒的DAS-ELISA检测和分子鉴定1,2,*1,2,*34551,2,**潘亚南，韩剑，吴海波，吉艳玲，王纯利，刘芳，罗明，6张祥林12（新疆农业大学农学院，乌鲁木齐830052；新疆自治区高校农林有害生物监测与安全防控重点实验室，乌鲁木齐34830052；新疆农业科学院哈密瓜研究中心，

2、乌鲁木齐830091；吐鲁番市农业技术推广中心，新疆吐鲁番838000；56鄯善县农业技术推广中心，新疆吐鲁番838200；新疆出入境检验检疫局，乌鲁木齐830063）摘要：为了明确当前新疆哈密瓜病毒病的主要毒原种类及其遗传分化，为哈密瓜病毒病害的防治提供科学依据，对吐鲁番、鄯善、昌吉等哈密瓜主产区的病毒病调查、采样，采用双抗体夹心酶联免疫吸附法（DAS–ELISA）和RT-PCR技术对侵染哈密瓜的7种主要病毒及瓜类重要检疫性病毒——黄瓜绿斑驳花叶病毒（Cucumbergreenmottlemosaicvirus，CGMM

3、V）进行检测和分子鉴定。结果表明：在所检测的121个样品中，黄瓜花叶病毒（Cucumbermosaicvirus，CMV）的检出率最高，为70.2%；西瓜花叶病毒（Watermelonmosaicvirus，WMV）和小西葫芦黄花叶病毒（Zucchiniyellowmosaicvirus，ZYMV）次之，分别为62.0%和37.2%，甜瓜坏死斑点病毒（Melonnecroticspotvirus，MNSV）的检出率仅为2.5%，CGMMV、南瓜花叶病毒（Squashmosaicvirus，SqMV）、番木瓜环斑病毒（Pap

4、ayaringspotvirusW，PRSV-W）和烟草坏死病毒（Tobacconecrosisvirus，TNV）未检测到。CMV、WMV、ZYMV在田间分布广泛，2种及3种病毒的复合侵染发生普遍（60.19%）。对各病毒分离物进行CP基因扩增、序列测定和系统发育分析，确定了CMV新疆哈密瓜分离物归属于CMV亚组ⅠB。ZYMV、WMV和MNSV与已报道的病毒株系CP基因核苷酸序列具有较高的同源性，但存在一定的变异，ZYMV和WMV具有明显的地域分化现象。关键词：哈密瓜；病毒；反转录PCR；复合侵染；遗传变异中图分类号：S

5、652.1文献标志码：A文章编号：0513-353X（2016）06-1107-10DetectionofVirusesInfectingHamiMelonandTheirMolecularIdentificationinXinjiang1,2,*1,2,*34551,2,**PANYa-nan，HANJian，WUHai-bo，JIYan-ling，WANGChun-li，LIUFang，LUOMing，6andZHANGXiang-lin12（AgronomyCollege，XinjiangAgriculturalUn

6、iversity，Urumqi830052，China；KeyLaboratoryofHarmfulBiological3MonitoringandSafetyPreventionofXinjiangAutonomousRegionForestryUniversities，Urumqi830052，China；Hami4MelonResearchCenter，XinjiangAcademyofAgriculturalSciences，Urumqi830091，China；TurpanAgricultural5Technol

7、ogyExtensionCenter，Turpan，Xinjiang838000，China；ShanshanAgriculturalTechnologyExtensionCenter，6Turpan，Xinjiang838200，China；XinjiangEntry-ExitInspectionandQuarantineBureau，Urumqi830063，China）收稿日期：2016–04–25；修回日期：2016–06–13基金项目：农业部西北荒漠绿洲作物有害生物综合治理重点实验室开放基金课题（KFJJ2015

8、0103）；新疆农业大学产学研联合培养研究生基金项目（xjaucxy-yjs-20131024）*并列第一作者**通信作者Authorforcorrespondence（E-mail：luomingxjau@sina.com）PanYa-nan，HanJian，WuHai-bo，JiYan-ling，W