ibv荧光定量pcr检测方法的建立及对感染鸡体内病毒的检测

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1、2014年第12期modernjournalofanimalhusbandryandveterinarymedicine于长泳：IBV荧光定量PCR检测方法的建立及对感染鸡体内病毒的检测1*#7႐ܻקਈ1$3࡟ҩٚمࡹ৫ࠣؓۋಙุ࠙ଽѨ׽࡟ҩႿӉႣ（辽宁省动物疫病预防控制中心，辽宁沈阳110164）ᅋေğIBVčinfectiousbronchitisvirusĎඋႿܳሑѨ׽ȧಕđॖၛႄఏ࠙ޫ་ࠥѨđᄯӮ࿸ᇗ෥ാđགྷᄝؓIBVᆐمٚҩ࡟PCRTime-laeRVBIਔ৫ࡹ࣮࿹Чbمٚᇕ؟ਔ৫ࡹđܼٗٳ൅ྛࣉ࣮࿹مٚ؎đቋ࡟ҩਲૹٚھ

2、ૼᆣđ%6.1j%7.0ູၳҵࡗϰđ%7.0j%1.0ູၳҵଽϰđ׽Ѩჷౚ෰ఃљ౵ིႵၛॖđLȰ/copies10ູمऎႵࢠۚਲૹྟaหၳྟބ໗קྟđѩؓٳ৖့׽ᇩck/HHLJ/HH13ࣉྛਔѨ׽ۋಙ൫ဒ࡟ҩđᄝุ࠙ଽగܵۋᇀđ௜ඣۚޓӻົᆰ၂׽Ѩᇏᄣയބܵగᇏఃđ୩ۚࢠႵऎ׻ᇏᄣയᄣ٫ಙު21dҌᇯࡶཨാđѨ৘ቆᆮ࿐ॖ࡮യᄣބగܵѨэቋ࿸ᇗđᆣൌਔ෮ٳ৖့׽ᇩck/HHLJ/HH13൞ऎႵޓ఼׽৯യ྘IBV׽ᇩbܱ࡯ՍğIBVĠReal-TimePCRĠۋಙĠѨ׽ٳᇏ๭щᅣ໓Bğ઒്ѓང໓31.852Sğোٳğ1672-9692

3、(2014)12-0001-06DetectionmethodestablishmentforIBVbyfluorescencequantitativePCRandthedetectionofIBVininfectedchickensYuChangyong(AnimalEpidemicDiseasesControlandPreventionCenterofLiaoningProvince,LiaoningSenyang110164)Abstract:IBVbelongstothecoronavirusγgroup,cancauset

4、hechickenrespiratorydiseases,whichcancauseseriouslosses.NowtherearemanymethodsarewidelyusedtodiagnoseIBV.ThisstudyusedmolecularbiologytechniquetoestablishReal-TimePCRmethodfordetectingIBV,theminimumdetectionsensitivitywas10copies/μL,couldeffectivelydistinguishbetweenot

5、heravianviruses;thedifferenceofthesameplatewas0.1%～0.7%and0.7%～1.6%indifferentplates,provethismethodhashighersensitivity,specificityandstability.Atthesametimewecarriedinfec-tionexperimentabouttheck/HHLJ/HH13isolatedfromwildstrain,andtesteditsconcentration.Theresultssho

6、wedthattherewashigherconcentrationintrachea,lungandkidneyinchickensaboutck/HHLJ/HH13,andtheconcentrationintracheaandkidneydisappearedgraduallyuntilday21,andtheirpathologicalchangeswereseriously,atlastwhichconfirmedck/HHLJ/HH13isolatedstrainwasastrongvirulencenephridium

7、IBVstrain.Keywords:Infectiousbronchitisvirus;Real-TimePCR;Infection;Virusdistribution鸡传染性支气管炎（Infectiousbronchitis，tisvirus，IBV）引起鸡的一种急性、高度接触传染IB）是由传染性支气管炎病毒（Infectiousbronchi-性、病毒性呼吸道疾病。IBV损害肾脏和生殖系统，൬۠ರ௹ğ2014-10-28ቔᆀࡥࢺğ于长泳（1978-），男，大学本科，高级兽医师，主要从事动物疫病防控、实验室检测、动物临床等方面工

8、作。2现代畜牧兽医2014年第12期引起雏鸡死亡、蛋鸡产蛋量和蛋品质下降，对养禽16.5μL；反应条件：95℃预变性5min；变性：[1]业造成很大的损失，由于IBV经常和其他病毒和细94℃30s；退火：55℃30s；延伸：72℃菌同