最新实验二-消毒与灭菌课件PPT.ppt

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1、实验二-消毒与灭菌实验二消毒与灭菌二、实验原理1、加热法分为干热灭菌和湿热灭菌（1）干热灭菌利用高温使微生物细胞内的蛋白质凝固变性而达到灭菌的目的。细胞内蛋白质凝固性与其本身的含水量有关，在菌体受热时，环境和细胞内含水量越大，则蛋白质凝固就越快；反之，含水量越小，凝固就慢。实验二消毒与灭菌二、实验原理1、加热法分为干热灭菌和湿热灭菌（1）干热灭菌有火焰灼烧和干热空气两种。火焰灼烧：适用于接种环、接种针、镊子、玻璃棒、试管口、瓶口。干热空气灭菌：160~170℃，1~2h，适用于培养皿、吸管、三角瓶等，>180℃，包器皿的纸或棉塞就会烧焦，甚至引起燃烧。电热鼓风干燥箱实验二消

2、毒与灭菌1、加热法湿热灭菌①高压蒸汽灭菌121℃持续15~30min。适用于培养基、工作服、橡胶物品、玻璃器皿等。是微生物实验室最常用的灭菌方法，使用频率很高，所以要求每个同学都需要掌握。实验二消毒与灭菌1、加热法湿热灭菌②常压蒸汽灭菌明胶、牛乳、含糖培养基等，可用阿诺氏流动蒸汽灭菌器，也可用普通蒸笼。含芽孢细菌，采用间歇灭菌，每天加热到100℃，持续30min，连续3天。第1天，100℃，30min，杀灭其中的营养体，取出常温放置18~24h；第2天，100℃，30min，芽孢萌发的营养体被杀死；第3天，100℃，30min，彻底灭菌。③④⑤实验二消毒与灭菌1、加热法湿热

3、灭菌③煮沸消毒法100℃下煮沸10~15min，一般适用于饮用水和食具的消毒、胶管、玻璃注射器和一般外科器械的简单消毒。延长煮沸时间，并加入1%的NaHCO3或2%的石炭酸，效果更好。实验二消毒与灭菌1、加热法湿热灭菌④超高温消毒（ultrahightemperaturesterilization，简称UHTS）135~150℃，2~8s。适用于牛乳或其他液态食品（如果汁、果汁饮料、豆乳、茶及矿泉水等）。特点：既能杀死产品中的微生物，又能较好地保持食品品质与营养价值。实验二消毒与灭菌二、实验原理2、紫外线灭菌紫外线灭菌时用紫外灯进行的。波长为200~300nm左右紫外线的杀

4、菌力最强。紫外灯管实验二消毒与灭菌二、实验原理2、紫外线灭菌杀菌机制：紫外线诱导了胸腺嘧啶二聚体的形成和DNA链的交联，从而抑制了DNA的复制；紫外线辐射能使空气中的氧电离称[o]，再使O2氧化生成臭氧（O3）或使水（H2O）氧化生成过氧化氢（H2O2）。O3和H2O2均有杀菌作用。但是紫外线的穿透力不强，一般是只适用于无菌室、接种箱、手术室内以及病房的空气及物体表面的灭菌。紫外灯照射物体以不超过1.2m为宜。实验二消毒与灭菌二、实验原理2、紫外线灭菌杀菌无菌室（或接种箱内）喷洒3~5%石炭酸溶液，一方面使空气中附着有微生物的尘埃降落，另一方面也可以杀死一部分细菌。无菌室内

5、的桌面、凳子也可用2~3%的来苏儿擦洗，然后打开紫外线照射，即可增强杀菌效果，达到灭菌目的。实验二消毒与灭菌二、实验原理3、过滤除菌（了解）通过机械作用滤去液体或气体中细菌的方法。优点：可以不破坏溶液中各种物质的化学成分；缺点：滤量有限。实验二消毒与灭菌二、实验原理4、使用化学药品化学药品消毒灭菌法是应用能抑制或杀死微生物的化学制剂进行消毒灭菌的方法。能破坏细菌代谢机能并有致死作用的化学药剂为杀菌剂，如重金属离子等；只是阻抑细菌代谢机能，使细菌不能增殖的化学药剂为抑菌剂，如磺胺类及大多数抗生素等。微生物实验室中常用的化学药品有2%煤酚皂溶液(来苏尔)，0.25%新洁尔灭，0

6、.1%升汞，3~5%的甲醛溶液，75%乙醇溶液等。实验二消毒与灭菌三、实验仪器与用具高压蒸汽灭菌锅；电热鼓风干燥箱；紫外照射灯；酒精灯；75%的酒精棉球；培养皿（包好的）、试管等。实验二消毒与灭菌四、实验步骤干热灭菌1．装入待灭菌物品将包好的待灭菌物品(培养皿．试管，吸管等)放入电烘箱内，关好箱门。物品不要摆放太挤，以免妨褐空气流通．灭菌物品不要接触电烘箱内壁的铁板，以防包装纸烤焦起火．实验二消毒与灭菌2、设定温度、升温通过数显板设定温度为160~170℃，之后开始升温。3、恒温当温度升到160~170℃时，开始计时，持续温度1~2h。4、降温切断电源、自然降温。5、开箱取

7、物待电烘箱内温度降到70℃以下后，打开箱门，取出灭菌物品。电烘箱内温度末降到70℃以前，切勿自行打开箱门，以免骤然降温导致玻璃器皿炸裂。实验二消毒与灭菌四、实验步骤湿热灭菌1、检查水位、添加蒸馏水；2、放入待灭菌的物品；3、加盖；4、设定程序，121℃，15~30min；5、排冷空气（非常重要，切勿忘记）；6、降温、降压，直到降为“0”；7、取出灭好菌的物品；8、无菌检验；灭菌培养基放入37℃恒温培养箱中培养24h，检验有无杂菌生长。实验二消毒与灭菌四、实验步骤紫外线灭菌（针对超净工作台上的紫外灯）1、使用前75%