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时间:2018-11-30
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1、第一篇微生物学基础第3章 消毒与灭菌第一节物理消毒灭菌法第二节化学消毒灭菌法第三节影响消毒灭菌效果的因素7/6/20211无菌操作基本技术灭菌接种7/6/20212灭菌(sterilization):杀灭或去除物体上所有微生物的方法,包括芽胞。消毒(disinfection):指杀死物体上病原微生物的方法,芽胞或非病原微生物可能仍存活。用于消毒的药品称为消毒剂(disinfectant)。防腐(antisepsis):体外防止或抑制细菌生长繁殖的方法。细菌一般不死亡。用于防腐的药品称为防腐剂(antiseptics)。第一节常用术语和概念7/6/20213抑菌(bact
2、eriostasis):抑制细菌和真菌的生长繁殖的方法。常用的抑菌剂(bacteriostat)是一些抗生素,能可逆性抑制细菌的繁殖,但不直接杀死细菌无菌(asepsis):指没有活菌的意思。无菌操作(antiseptictechnique):指防止细菌进入人体或其他物品的操作技术。清洁和净化:减少微生物数量或活性的方法。7/6/20214第二节消毒灭菌方式一、物理消毒灭菌法热力灭菌法干热灭菌法 湿热灭菌法光线与射线过滤除菌超声波消毒法干燥与低温抑菌法7/6/20215干热灭菌法:使微生物脱水干燥和大分子变性死亡焚烧烧灼干烤:通常加温160~180℃保持2h红外线灭
3、菌7/6/20216湿热灭菌法在同一温度下湿热的杀菌效果比干热好,因为:温热灭菌时菌体蛋白质易变性;湿热穿透力大;湿热蒸汽有潜热存在。7/6/20217巴氏消毒法(pasteurization)61.1~62.8℃30min71.7℃15~30秒杀死液体中的病原菌或某些特定微生物。消毒牛奶、酒类等食品。7/6/20218煮沸消毒法煮沸100℃经5min可杀死一切细菌的繁殖体,一般消毒以煮沸10min为宜。芽胞需1~2小时才能杀死。用于一般外科器械、胶管和注射器、饮水和食具的消毒。7/6/20219流通蒸汽灭菌法细菌繁殖体需15-30min才能杀死,但芽胞不会被全部杀死。
4、间歇灭菌法本法是利用反复多次的流通蒸汽灭菌,以达到灭菌的目的。只适用于不耐热(100℃以内)的营养物质如某些培养基的灭菌。7/6/202110高压蒸汽法Autoclaving压力:1.05kg/cm2温度:121.3℃时间:15~30min效果杀死一切微生物,包括芽胞耐高热、不怕潮湿的物品7/6/202111燃料加热压力锅式高压灭菌器7/6/202112光线与射线日光和紫外线杀菌波长:240~280nm,最适:260nm杀菌机制:破坏核酸结构用于物体表面和空气消毒电离射线和微波γ射线、高能量的电子束(阴极射线)不升高温度且穿透力强适于忌热物品的灭菌或消毒7/6/2021
5、13滤过除菌(filter)常用不能加热灭菌的血清或液体不能除去病毒、支原体和L型细菌常用的除菌滤器蔡氏(Seitz)滤器玻璃滤器薄膜滤器7/6/202114超声波消毒法:杀菌不彻底,主要用于破碎细菌,提取菌体组分。腌制干燥与低温抑菌法:主要用于保存食品、保存菌种。真空干燥法7/6/202115二、化学消毒灭菌法类别作用机制常用种类酚类蛋白变性,细胞膜损伤石炭酸醇类蛋白变性乙醇氧化剂氧化、蛋白沉淀高锰酸钾、过氧乙酸、碘酒重金属盐氧化、蛋白酶变性红汞、硫柳汞表面活性剂蛋白变性,细胞膜损伤新洁而灭染料干扰氧化、抑制繁殖龙胆紫酸碱类破坏膜、壁,蛋白凝固醋酸、生石灰烷化剂蛋白质
6、、核酸烷基化环氧乙烷7/6/202116消毒剂的作用机理使细胞膜通透性受损;使菌体蛋白变性和凝固,失去生物活性,导致细菌死亡;破坏或改变蛋白质与核酸功能基团,使菌体酶蛋白失去酶的活性。7/6/202117二、化学消毒灭菌法(一)高效消毒剂(high-leveldisinfectants)1.含氯消毒剂;2.过氧化物消毒剂;3.醛类消毒剂;4.环氧乙烷(二)中效消毒剂(intermediate-leveldisinfectants)1.含碘消毒剂;2.醇类消毒剂(三)低效消毒剂(low-leveldisinfectants)1.季铵盐类;2.氯已定;3.高锰酸钾7/6/2
7、02118固体二氧化氯消毒剂7/6/202119第三节消毒灭菌的运用(一)高危器械物品用时需进入无菌组织的物品。所有这些物品都应该灭菌。(二)中危器械物品用时不进入无菌组织但接触黏膜的器械。采用消毒即可。(三)低危器械物品只接触未损伤皮肤但不进入无菌组织和不接触黏膜的物品。一般用后清洗、消毒即可。(四)快速周转的医疗器械一、医疗器械物品的消毒灭菌7/6/202120(二)室内空气消毒灭菌1.物理消毒法①紫外线照射(1.5W/m3,1h)最常用;②滤过除菌:空气通过孔径小于0.2μm的高效过滤装置以除去细菌和带菌尘埃。2.化学消毒法包括化学
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