小豆蔻明诱导K562细胞凋亡及其相关凋亡蛋白的表达.pdf

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1、2014年10月中国比较医学杂志October,2014第24卷第10期CHINESEJOURNALOFCOMPARATIVEMEDICINEVo1.24No.10小豆蔻明诱导K562细胞凋亡及其相关凋亡蛋白的表达翟斡,沈一平,沈嫣婧。,楼正青,丁志山(1.浙江省立同德医院,浙江杭州310012;2.浙江省中医院,浙江杭州310006;3.杭州市中医院,浙江杭州310007;4.浙江中医药大学,浙江杭州310053)【摘要】目的探讨小豆蔻明诱导K562细胞凋亡与PTEN、p-Akt、NF—KB、Bcl-2等抑凋亡蛋白及促凋亡蛋

2、白表达量的关系。方法①普通光镜观察小豆蔻明作用K562细胞48h后的细胞形态学变化。②采用MTT法检测小豆蔻明作用K562细胞48h后的凋亡情况,计算Ic。③应用流式细胞仪检测小豆蔻明作用K562细胞48h后的细胞凋亡率。④采用RT—PCR技术检测小豆蔻明作用K562细胞48h后Bc1.2、Bax的mRNA表达量。⑤采用Westernblot技术检测小豆蔻明作用K562细胞48h后PTEN、p-Akt、NF—KB、Bcl一2的蛋白表达量。结果小豆蔻明作用K562细胞48h后,形态学出现明显凋亡现象。MTT提示K562细胞增殖抑

3、制明显且呈量效和时效关系。早期凋亡率与空白组比有显著增加(P<0.05),呈剂量依赖关系。Bel-2mRNA的表达较空白组明显下降(P<0.05),BaxmRNA的表达较空白组明显升高(P<0.05),呈现浓度依赖性。PTEN蛋白表达量随小豆蔻明的浓度增加明显增加,而p-Akt、NF—zB、Bcl-2蛋白表达量则减少。结论小豆蔻明通过增加PTEN蛋白的表达量,同时下调p-Akt、NF—zB、Bel-2蛋白的表达量促进K562细胞的凋亡,且呈剂量依赖性。【关键词】小豆蔻明、K562细胞、凋亡、PTEN、p-Akt、NF-KB、B

4、cl-2【中图分类号】R33【文献标识码】A【文章编号】1671—7856(2014J10-0007-O5doi:10.3969.J.issn.1671.7856.2014.010.002Cardamonininducesapoptosisandexpressionofapoptosis-relatedproteinsinK562cellsZHAIWo,SHENYi.ping,SHENYan-jing。,LOUZheng-qing,DINGZhi—shan(1.TongDeHospitalofZhejiangProvince,

5、Hangzhou310012,China;2.ZhejiangProvincialHospitalofTraditionalChineseMedicine,Hangzhou310006;3.HangzhouHospitalofTraditionalChineseMedicine,Hangzhou310007;4.ZhejiangUniversityofTraditionalChineseMedicine,Hangzhou310053)【AbstractJ0bjectiveToobservetheapoptoticeffecto

6、feardamoninonK562ceilsanditsrelationshipwiththeexpressionsofPTEN,p-Akt,NF.KBandBel-2.MethodsK562cellsweretreatedwithcardamoninfor48h,andthefollowingtestswereperformed:(1)Thecellmorphologywasobservedbylightmicroscopy.(2)IC50oftheK562cellswasdterminedbyMTTtest.(3)Thea

7、poptosisratewasdetectedbyflowcytometry.(4)TheexpressionsofBcl-2andBax[基金项目]浙江省医药卫生一般研究计划(2012KYB136);浙江省大学生科技创新活动计划资助项目(2012R410057)。【作者简介】翟斡(1986一),男,浙江省立同德医院血液科,研究方向:血液病研究,657572008@qq.corn。[通讯作者】丁志山(1967一),男,浙江中医药大学,研究方向:肿瘤耐药机制研究,邮箱zjtcmdzs@163.corn。8中国比较医学杂志2014

8、年1O月第24卷第lO期ChinJCompMeal,October2014,Vn1.24.No.10mRNAweredetectedabyRT—PCR.(5)TheexpressionsofPTEN,p-Akt,NF—KBandBcl一2proteinsweredetecte

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