半枝莲提取物诱导人肝癌SMMC7721细胞凋亡及其对凋亡相关蛋白表达的影响

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1、半枝莲提取物诱导人肝癌SMMC-7721细胞凋亡及其对凋亡相关蛋白表达的影响作者：韦鹏涯浦洪琴韦星宾晓芸李朝敢【摘要】　　目的探讨半枝莲提取物(ScutellariabarbataD.Donextract,SBE)对人肝癌SMMC-7721细胞凋亡及凋亡相关蛋白Bcl-2，Survivin和Caspase-3表达的影响。方法体外培养SMMC-7721细胞，以2.5，5和10mg·L-1SBE处理48h，并以2.5mg·L-1顺铂（DDP）作为阳性对照。用MTT法检测细胞抑制率，流式细胞仪检测细胞凋亡率，二步法免疫组

2、化检测Bcl-2，Survivin和Caspase-3蛋白表达。结果与正常对照组相比，SBE各浓度组细胞抑制率显著升高（P﹤0.001），细胞凋亡率明显上升（P﹤0.01），Caspase-3蛋白表达显著上升（P<0.01或P<0.05），Bcl-2和Survivin蛋白表达明显下降（P<0.01或P<0.05）。结论SBE具有诱导肝癌SMMC-7721细胞凋亡的作用，其分子机制可能与上调Caspase-3蛋白表达以及下调Bcl-2和Survivin蛋白表达有关。【关键词】半枝莲SMMC-7

3、721细胞细胞凋亡Bcl-2;SurvivinCaspase-3　　Abstract：ObjectiveToexploretheapoptosis-inducingeffectofScutellariabarbataD.Donextract（SBE）andthe11expressionofapoptosisassociatedproteinsBcl-2,SurvivinandCaspase-3onhumanlivercancerSMMC-7721cells.MethodsSMMC-7721cellsweretrea

4、tedwith2.5,5and10mg·L-1SBEfor48h,andthecellsweretreatedwith2.5mg·L-1DDPaspositivecontrol.TheinhibitoryratwasevaluatedbyMTTassay.Theapoptoticratewasdeterminedbyflowcytometry.TheexpressionofBcl-2,SurvivinandCaspase-3proteinsweredetectedbytwo-stepimmunohistochemi

5、calstaining.ResultsComparedwithcontrolgroup,theinhibitoryratewasincreasedobviously(P<0.001),theapoptoticratewasincreasedmarkedly(P<0.01),theexpressionofCaspase-3proteinwasincreasedsignificantly(P<0.01orP<0.05),whileBcl-2andSurvivinproteinsweredecre

6、asedmarkedly(P<0.01orP<0.05)inSBEgroups.ConclusionSBEcaninduceapoptosisoflivercancerSMMC-7721cells.Themolecularmechanismmightberelatedtoup-regulatingtheexpressionofCaspase-3anddown-regulatingtheexpressionofBcl-2andSurvivinapoptosisrelatedproteins.　　Keywo

7、rds：ScutellariabarbataD.Don;SMMC-7721cells;Apoptosis11　　半枝莲ScutellariabarbataD.Don，SB属于唇形科植物，临床上常用于肝癌、肺癌、胃癌和鼻咽癌等多种癌症防治，但具体的抗癌机制尚不明确。研究发现，半枝莲提取物（SBE）能诱导白血病K562细胞凋亡，其作用机制可能与Caspase3的表达升高和活化有关［1］；SBE可诱导人肝癌QGY-7701细胞凋亡，并能上调Bax和下调Bcl-2的表达［2］；SBE还通过上调凋亡相关基因蛋白Fas表达，促

8、进人肝癌Hep-G2细胞凋亡［3］。本研究观察了SBE诱导人肝癌SMMC-7721细胞凋亡作用，并检测凋亡相关蛋白Bcl-2，Survivin和Caspase-3表达情况，以探讨SB抗肝癌作用及其初步分子机制，为临床应用提供实验依据。　　1器材与方法　　1.1材料　　1.1.1细胞　　人肝癌细胞株SMMC-7721由中科院上海细胞生物研究所细胞库提供。　　1