亚硒酸化β乳球蛋白诱导k562细胞凋亡及其机制研究

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1、－－．．天津科技大学研究生学位论文（申请硕ｉ学位）■＂＇亚硕酸化目乳球蛋白诱导Ｋ５６２细胞调亡及其机制研究－－ＬＡＣＴＯＧＬＯＢＵＬＩＮＭＥＣＨＡＮＩＳＭＳＴＵＤＹＯＦＳＥＬＥＮＥＯＮＰＡＰＯＰＴＯＴＩＣＥＦＦＥＣＴＩＮＫ５６２ＣＥＬＬＳ－．．专业名碌：食品科学指导教师：刘安军教授研究生姓名；雜丽峭学位级别；工学硕±论文提交日期；２０１４年１２月；Ｒ７３０．１学校分类号代码：１００５７密级：不保密研巧生学号；１２８０８０２１亚砸酸化目魏球蛋白诱导Ｋ５６２细胞调

2、亡及其机制研究－Ｓｔｕｏｆ－ＭｅｃｈａｎｉｓｍｄｙＳｅｌｅｎｅＬａｃｔｏｌｏｂｕｌｉｎｏｎＡｏｔｏｓｉｓＥｆｆｅｃｔ虹ｐｇｐｐＫ５６２ＣｅＤｓ专业名称：食品科学指导教师姓名：刘安军教授研巧生姓名：索佳丽申请学位级别；工学硕±论文提交日期：２０１４年１２月论文课题来源；国家自然基金学位授予单位：天津科技大学天津科技大学学位论文原创性声明本人郑重声明：所呈交的论文是本人在导师的指导下独立进行研究工作所取得的成果。除文中特别加Ｗ标注引用的内容外，本论文不包括任何其他个人或集体已经发

3、表或撰写的成果内容，也不包括为获得天津科技大学或其它教育机构的学位或证书而。。使用过的材料对本文研巧做出重要贡献的个人和集体，均己在文中Ｗ明确方式标明本人完全意识到本声明的法律后果由本人承担。作者签名：氣像＾曰親年３月巧曰知识产权和专利权保护声明本人郑重声明：所呈交的论文是本人在导师具体指导下并得到相关研巧经费支持下完成的，其数据和研究成果归属于导师和作者本人，知识产权单位属天津科技大学；所涉及的创造性发明的专利权及使用权完全归天津科技大学所有。本人保证毕业后，Ｗ本论文数据和资料发表论文或使用论文工作成果时署名

4、第一单位仍然为天津科技大学。本人完全意识到本声明的法律后果由本人承担。作者签名：日期；＞狂年女月乃日学位论文版权使用授权书、本学位论文作者完全了解学校有关保留使用学位论文的规定，同意学校保留并向国家有关部口或机构送交论文的复印件和电子版，同意公布论文的全部或部分内。容，允许论文被查阅和借阅本人授权天津科技大学可Ｗ将本学位论文的全部或部分ｉｌ内容编入有关数据库进行检索，可采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本＾＾学位论文。＂＂保密Ｄ（请在方框内打Ｖ），在年解密后适用本授权书。本学位论文属于＾‘

5、＂不保密０（请在方框内巧Ｖ）。：作者签名：日期年＾月日导师签名：月５日：日期知／立年令＾摘要－亚砸酸化，在与本文！ｐ乳球蛋白为研究对象对其体外抗肿瘤活性进行测定Ｋ５拍细胞共培养后，研巧其对Ｋ５６２细胞增殖的抑制作用和诱导调亡作用。通过ＭＴＴ法、、、ＨＥ染色、流式细胞术免疫焚光法和巧光定量ＰＣＲ等方法从细胞形态学的变化细胞周期的变化和相关周期蛋白及其ｍＲＮＡ的表达等方面考察了亚砸酸化Ｐ－乳球蛋白对Ｋ５６２细胞的影响。亚砸酸化－５６２细首先，对Ｐ乳球蛋白诱导Ｋ胞调亡的现象进行研巧。ＭＴＴ实验结果表明－乳球蛋白

6、对Ｋ５６２，随着浓度和培养时间的升高，亚捆酸化Ｐ细胞的抑制作用逐渐变强ＺｍＬ药物作用Ｋ５６２细胞４８ｈ后，抑制率达到９０％，而正常小鼠成，１００帖巧维细胞Ｃ２Ｃ１２在经过相同处理后仍然正常生长；ＨＥ染色和ＰＩ／Ｈｏｅｃｈ巧双染均观察－乳球蛋白使Ｋ５拍细胞出现体积缩小到亚砸酸化Ｐ、核质分离、出现调亡小体等典型－ｍｅｘｎＶ－／的调ｔ现象；ＡｉｉｎＴＣＰＩ双染结果表明，经过４８ｈ与亚砸酸化Ｐ乱球蛋白巧培养的Ｋ５仿细胞的稠ｔ率为１８．７５％，而共培养７２ｈ后调亡率上升为４０．７６％；流式细胞术结果表明亚砸酸化－孔球蛋白能够使

7、细胞ＧＰｉ期和〇２期发生显著变化，细胞分别被阻滞于Ｓ一Ｇ２期和Ｇ２＾Ｍ期。－５６２其次，研究了亚砸酸化Ｐ乳球蛋白诱导Ｋ细胞调亡的信号途径。免疫巧光实－５６２验和ＥＬＩＳＡ法共同确定了经过亚砸酸化Ｐ乳球蛋白处理的Ｋ细胞，其巧ｃｌｉｎＢｌ亚洒酸化－蛋白含量湿著降低，２１蛋白含量显著上升现球蛋白还使Ｋ５６２细胞的ｐ；ＰｃｙｃｌｉｎＢｌｍＲＮＡ７ｊＣ平下调，极显著上调ｐ２１ｍＲＮＡ７ｊＣ平，是对照组的２１倍，并且还显著下调蛋白激酶ＣＤＫ４ｍＲＮＡ的表达水平。综上所述－乳球蛋白能够在体外有效的抑制白血病细胞Ｋ５拉的增殖，亚

8、砸酸化Ｐ一：并且诱导其调ｔ，是种很有潜力的抗癌活性物质。－她出２１２１蛋白关键词：亚砸酸化Ｐ乳球蛋白；Ｋ５６细胞；细胞调亡：巧；