酶法制备豆粕抗氧化蛋白肽的研究火麻乳饮料制浆工艺的研究.pdf

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1、食品，II斜枝SdenceandTechnologyofFoodIndustry三艺技求马利华。秦卫东，陈学红(徐州工程学院食品学院，江苏徐州221008)摘要：研究复合酶制备豆粕抗氧化蛋白肽的条件，采用响应曲面实验设计，优化酶解工艺，并采用高效液相色谱法对多肽酶解液进行分离纯化及抗氧化性能的测定。结果表明：胰蛋白酶与碱性蛋白酶的比例为2：1，制备豆粕抗氧化蛋白肽的最佳酶解条件为：温度60~C，时间1．5h，底物浓度8％，酶用量0．4AU／g，得到蛋白肽含量14．08mg／g。高效液相色谱法分离出3个组分，且组分1的抗氧化效果好于其他组分。关键词：复合酶

2、，大豆多肽，响应曲面，抗氧化性PerparationofantioxidantpeptidesfrOmsoybeanmealbycomplexenzymeM_ALi—hua，QINWei-dong，CHENXue-hong(FoodEngineeringCollegeofXuzhouInstitute，Xuzhou221008，China)Abstract：TheoptimalconditionsofoxidationresistsoybeanpeptidesbycomplexenzymewereinvestigatedwithRSM．Thezymohy

3、drolysissupernatantofsoybeanpeptidewereseparationandpurificationbyHPLCanditsinoxidabilityweredetermined．Theresultsshowedthattheoptimalzymohydrolysisproportionwas：trypsinase：alkaliprotease2：1，temperature60oC，time1．5h，theconcentration8％，enzymedosage0．4AU／g，thecontentsofoxidationres

4、istsoybeanpeptideswas14．08mg／g．ThezymohydrolysissupernatantofsoybeanmealwerethreecomponentwithHPLC，andfraction1wassuperiortoothers．Keywords：complexenzyme；soybeanpeptide；RSM；inoxidizability中图分类号：TS201．21文献标识码：B文章编号：1002—0306(2012)06—0340—06大豆是我国大面积种植的油料作物，含有丰富亮蓝G一250、牛血清白蛋白、硫代巴比妥酸

5、、硫酸亚的营养物质，尤其是蛋白质、亚油酸以及一些必需氨铁等均为分析纯，国药集团化学试剂有限公司；胰基酸，对人体均有良好的调节、保健功能。随着蛋白酶、酸性蛋白酶、碱性蛋白酶、中性蛋白酶、木瓜生物技术的进步和生命科学的发展，研究发现某些蛋白酶酶活均为15AU／g，无锡市雪梅酶制剂科技蛋白质无生理活性或活性很低，而其水解后产生的有限公司；DPPH生化试剂，SIGMA。肽类却具有很强的生理活性。近年来，研究人员利DHG9140型电热恒温鼓风干燥箱、7230G型可用酶技术得到的大豆酶水解物即大豆生物活性肽，见分光光度计、精密酸度计PHS一3CA上海精宏实具有营养全

6、面、易消化吸收等诸多特性，尤其是验设备有限公司；Agilentl00高效液相色谱仪美国具有清除羟基自由基、终止单线态氧的生成、络Agilent公司。合促氧化的过渡、抗氧化、降胆固醇、抗辐射、调节1．2实验方法免疫、抗疲劳、增强肌肉运动能力、抑制肿瘤等非特1．2．1酶种类的确定分别称取酸性蛋白酶、碱性异性作用J，还能降低自动氧化速率和脂肪的过氧蛋白酶、中性蛋白酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶各1g，加化物含量等功效。因此，开发大豆生物活性肽可入豆粕，调整酶用量为0．5AU／g，酶解温度45℃，酶解以大幅度提高大豆制品的附加值，拓宽大豆的用途，应时间2h，自然条件下

7、酶解后，4000r／min离心15min，用前景十分广阔。本实验以脱脂后的豆粕为原料，采上清液在100~12的沸水中灭酶3min，测定多肽含量。用复合酶对豆粕进行有效的酶解，并进行抗氧化性的1．2．2复配酶比例的确定将选取的两种酶调节研究，使其成为豆粕高值化利用的有效途径之一。为3：1，2：1，1：1，1：2，1：3的比例，加入豆粕，酶用量1材料与方法0．5AU／g，酶解温度45℃，酶解时间2h，自然条件下酶1．1材料与仪器解后，4000r／min离心15rain，上清液在100~C的沸水冰乙酸、无水乙醇、三氯乙酸、95％乙醇、考马斯中灭酶3min，测定

8、多肽含量。1．2．3豆粕多肽酶解调节酶用量分别为0．1、收稿日期：2011—06