响应面法优化油莎豆粕蛋白抗氧化肽制备工艺-论文.pdf

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1、●工艺技术住矗工案响应面法优化油莎豆粕蛋白抗氧化肽制备工艺胡炜东，蔡永敏，鲁富宽内蒙古农业大学职业技术学院(包头014109)摘要选用油莎豆粕蛋白为原料，利用碱性蛋白酶制备油莎粕抗氧化肽，v；~DPPH自由基清除率为评价指标，对底物质量浓度、加酶量、pH、酶解温度、酶解时间进行研究，在单因素试验的基础上，利用Box—Benhnken中心组合设计原理对试验进行优化，通过响应面分析，确定酶解的较佳工艺为底物质量浓度0．06g／mL，加酶量为7000U／g蛋白质，pH9．5，酶解温度50℃，酶解时间5h，在此条件下，DPPH自由基清除率84．5

2、4％。关键词油莎豆粕蛋白；抗氧化肽；酶解；响应面法OptimizationofPreparationProcessingforAntioxidantPeptidesfrOmCyperusesculeutusMeaIProteinbyResponseSurfaceMethodologyHuWei-dong，CaiYong-min，LuFu—kuanVocationalandTechnicalCollegeoflMAU(Baotou014109)AbstractCyperusesculeutusmealproteinasrawmaterial

3、,preparationofCyperusesculeutusmealantioxidantpeptidebyalkalineproteasesystem,theDHHPfreeradicalscavengingrateasevaluationindex,selectionofsubstramconcentration,enzymedosage，pH,hydrolysistemperatureandhydrolysistimeastheresearchobject,onthebasisofsinglefactortest,optimiza

4、tionoftheexperimentusiIlgtheBox-Benhnkenprincipleforcentralcompositedesign．Byresponsesurfaceanalysis，theoptimumhydrolysisconditionsweredeterminedasubstrateconcentration0．06舭，enzymedosage7000U／gprotein,pH9．5，hydrolysistemperature50℃andhydrolysistime51LtheDPPHfreeradicalsca

5、vengingratefortheseoptimumconditionwas84．54％．KeywordsCyperusesculeutusmealprotein；antioxidantpeptides；hydrolysis；responsesurfacemethodology抗氧化剂被广泛用于食品添加剂，由于合成添加基苯肼(DPPH)：美国Sigma公司；所用试剂均为分剂的毒性受到质疑，天然抗氧化肽具有低毒、高效、析纯：内蒙鸿日公司。易吸收等特点，越来越受到人们的青睐，抗氧化肽的1．2仪器与设备摄入可以降低体内自由基水平，防止脂质氧化，

6、帮助TU一1901双光束紫外可见分光光度计：北京普析机体抵御疾病⋯。通用仪器有限责任公司；PHS一3EpH计：上海仪电科油莎豆又称油莎草、洋地栗，原产于非洲地中海学仪器股份有限公司；冷冻干燥机：北京博医康实验沿岸，是莎草科莎草属多年生草本植物，具有必需脂仪器有限公司；SC一3610离心机：安徽中科中佳科学肪酸、淀粉、蛋白质和多种维生素等】，广泛分布于仪器有限公司。北京、内蒙古等多个省市自治区。对于油莎豆的研究1．3油莎豆粕抗氧化肽制备工艺大多集中在种植技术p】，油脂【4】，淀粉I卅等方面，但1．3．1工艺流程【7鲜见油莎豆脱脂后的副产品—

7、—油莎豆粕的研究，油脱脂油莎豆粕一干燥一粉碎一1：20(g／mL)莎豆粕中含有丰富的蛋白，选择适合的蛋白酶酶解油调浆一调pH9．O一50℃搅拌浸提1h一离心(6000r／莎豆粕蛋白制备具有抗氧化肽段，对油莎豆粕的开发min，15min)_÷上清液调pH至4．5一酸沉一离心和利用具有重要意义。研究利用碱性蛋白酶制备抗氧(6000r／min，15min)一冷冻干燥一油莎豆粕蛋白化肽，采用响应面分析法对油莎豆粕抗氧化肽制备工质一配制油莎豆蛋白悬浮液一热变性处理(90oC，10艺进行优化，为油莎豆粕蛋白进一步开发提供理论min)一调pH一蛋白酶酶

8、解一灭酶(100oC，10min)依据。一冷却一离心(6000r／min，15min)一上清液(油莎豆粕蛋白抗氧化肽)1材料与方法1．3．2DPPH自由基清除率的测定1．1材料与试剂采用比色法