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1、第31卷第11期中华中医药学刊V01.3lNo.112013年11月CHINESEARCHIVESOFTRADITIONALCHINESEMEDICINENov.2013鳖甲水煎液药物血清对肝星状细胞的作用高建蓉,姚航平,刘焱文,刘建文,张赤志,丁永祥,刘林,唐尹萍,张东泉,胡祖良,张洪球(1.浙江衢化医院,浙江衢化324004;2.浙江大学医学院附属第一医院,浙江杭州310000;3.湖北中医药大学,湖北武汉430061;4.华东理工大学药学院,上海200237)摘要:目的:实验研究鳖甲水煎液药物血清对肝星状细胞的影响和作用机制。方法:双抗夹心ELISA法检测鳖甲水煎液药物血清对T
2、GF一131刺激的LX一1细胞胶原及调节因子表达的影响,MTS法检测鳖甲水煎液药物血清对TGF—B1刺激的LX一1细胞增殖的影响,Westernblot检测鳖甲水煎液药物血清对TGF一131刺激的LX一1细胞活化、胶原合成及细胞外基质等表达的影响。结果:鳖甲水煎液药物血清能明显抑制TGF一131刺激的LX一1细胞的增殖;显著下调TGF一131刺激的LX一1细胞I、Ⅲ、Ⅳ型胶原、HA与仅一SMA蛋白表达;并作用于TGF—pl下游信号通道蛋白,抑制Smad3及P—smad3等因子表达,从而阻断TGF—p1等因子的生物学效应;能显著上调MMPl、MMP3蛋白表达,同时通过抑制TIMP一1蛋
3、白表达、更有利于改善胶原酶活性,从而促进ECM的降解。在实验浓度范围内,鳖甲水煎液药物血清对肝星状细胞的作用呈现量效关系,作用显著优于目前有效的抗肝纤维化药物或细胞因子IFN一^y,与扶正化瘀胶囊作用相当。结论:鳖甲水煎液药物血清能抑制肝星状细胞活化增殖及细胞外基质合成分泌、促进细胞外基质降解吸收,调控细胞因子水平及信号传导通路,从而发挥抗肝纤维化的作用。本实验进一步验证了鳖甲抗肝纤维化药效学的有效性,为鳖甲抗肝纤维化的药效物质基础研究及其活性组分抗纤维化新药研发、保健品开发和临床医疗提供科学依据和研究思路。关键词:鳖甲;水煎液;药物血清;肝星状细胞中图分类号:R285.5文献标志码
4、:A文章编号:1673—7717(2013)11—2524—05TurtleCarapaceDecoctionandDrugContainingSerumonHepaticStellateCellsGAOJianrong,YAOHangping,LIUYanwen,LIUJanwen,ZHANGChizhi,DINGYongxiang,LIULin,TANGYinping,ZhangDongquan,HUZuliang‘,ZHANGHongqiu(1.ZhejiangQuhuaHospital,Quzhou324004,Zhejiang,China;2.TheFirstAffilia
5、tedHospital,MedicalCollegeofZhejiangUniversity,Hangzhou310003,Zhejiang,China;3.HubeiUniversityofTraditionalChineseMedicine,Wuhan430061,Hubei,China;4.PharmacyCollegeofEastChinaUniversityofScienceandTechnology,Shanghai200237,China)Abstract:ORctive:ToevaluatetheTurtleCarapaceDecoctionanddrugcontai
6、ningserumonhepaticstellateceils(HSC).Methods:Double—antibodysandwichELISAassaywasusedtodetecttheeffectofTurtleCarapaceDecoctionanddrugcontainingserumonTGF一131一inducedcollagenandregulatoryfactorsexpressioninLX一1cells:MTSassaywasusedtodetecttheeffectofTurtleCarapaceDecoctionanddrugcontainingserum
7、onTGF—B1一inducedLX一1cellpro—liferation;WesternblottinganalysiswasusedtodetecttheeffectofTurtleCarapaceDecoctionanddrugcontainingserumonTGF—B1一inducedLX一1cellactivation,collagensynthesisandextracellularmatrixexpression.Results:Turt
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