蕲艾提取液药物血清对大鼠肝星状细胞凋亡的影响.pdf

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1、中西医结合肝病杂志2013年第23卷第5期·289·doi：10．3969／j．issn．1005-0264．2013．05．013蕲艾提取液药物血清对大鼠肝星状细胞凋亡的影响费新应周虹李华成熊振芳张赤志1．湖北省黄石市中医医院肝病科(湖北黄石，435000)2．湖北中医药大学摘要目的：研究蕲艾提取液药物血清对大鼠肝星状细胞(HSC)凋亡的影响。方法：传代培养的HSC—T6与蕲艾提取液药物血清共同培养24小时后，采用AnnexinV／PI对双染结合流式细胞仪检测细胞凋亡。结果：蕲艾提取液药物血清组早期细胞凋亡率显著高于空

2、白对照组及生理盐水血清组(P<0．01)，并且随着血清浓度的增加，HSC．T6早期细胞凋亡率逐渐增高，呈剂量依赖关系。结论：蕲艾提取液药物血清促进HSC凋亡，这可能是蕲艾提取液药物血清抗肝纤维化作用机制之一。关键词肝纤维化；肝星状细胞；艾叶／药效学；细胞凋亡EfectofartemisiaargyiextractsolutiondrugserumonapoptosisofhepaticstellatecellsinratFElXIN-YING，ZHOUHONG，LIHUA—CHENG，eta1．DepartmentofH

3、epatology，HuangshiHospitalofTCMHuangshiHu—bei，435000)ChinaAbstract0bjective：Toinvestigatetheefectofartemisiaargyiextractsolutiondrugserllmonapoptosisofhepaticstellatecells(HSC)inrat．Methods：HSC-T6wasincubatedwithdiferentconcentrationsofartemisiaargyiextractsoluti

4、ondrugserum(5％，10％，20％)for24hours，theapoptosisofHSC—T6wasdetectedbyfloweytometrywithAnnexinVandPIstaining．Results：Thepercentageofearlyapoptoticcellsofartemisiaargyiextractsolutiondrugserumgroupwassignificantlyhigherthanblankcontrolgroupandsalinegroup(P<0．01)．With

5、theincreaseofserumconcentration，HSC—T6cellearlyap—optosisratewasgraduallyincreasedinadose—dependentmanner．Conclusion：ArtemisiaargyiextractsolutiondrugserumcanpromoteHSCapoptosis，whichmaybeoneofthemechanismsofanti—liverfibrosis．KeyWordshepaticfibrosis；hepaticstell

6、atecells；artemisiaargyifpharmaeodynamics；cellapoptosis肝纤维化(hepaticfibrosis，HF)是慢性肝病的共同病理小牛血清(FCS)购自Gibeo公司，胰蛋白酶(trysin)、二甲学基础，是形成肝硬化的必经病理阶段，其实质在于细胞外基亚砜(DMSO)购自Amresco公司，Pl染色液购自BioSharp基质(ECM)的过量沉积⋯。蕲艾具有抗肝损伤、保护肝细公司。流式细胞仪为美国BD公司产品，倒置显微镜、显微摄胞、降低肝纤维化指标等作用-5]。但其作用机制尚未

7、完全像装置为日本Olympus公司产品，二氧化碳培养箱为上海福阐明，本实验从蕲艾提取液药物血清对HSC细胞凋亡入手，玛实验设备有限公司产品，超净工作台为苏州安泰空气技术研究蕲艾提取液抗肝纤维化的作用机制。有限公司产品。1材料与方法1．2蕲艾提取液药物血清的制备取蕲艾200g，加水1．1实验动物及材料4周龄清洁级雄性Wistar大鼠20只，2000ml，用蒸馏法提取蒸馏液1000ml，105~(2高压灭菌30分体重(180±20)g，由华中科技大学同济医学院实验动物中钟即得20％蕲艾提取液。给正常20只Wistar大鼠分别

8、灌服心提供[试验动物合格证SCXK(鄂)2004-0007]。蕲艾提取20％蕲艾提取液20ml／kg，bid，连续3天，末次给药后1小时液由黄石市中医院制剂室制备。肝星状细胞系HSC—T6购自中采血，并离心后取血清，于56~C灭活30分钟，灭菌血清分南大学湘雅医学院细胞库。DMEM培养基购自Hyclone公司，装、冻