米诺环素对PC12细胞缺氧缺糖损伤后神经突生长的影响.pdf

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1、重庆医学2015年2月第44卷第5期6O5论著·基础研究doi：10．3969／j．issn．1671—8348．2015．05．009米诺环素对PC12细胞缺氧缺糖损伤后神经突生长的影响陶涛，秦新月，冯金洲，罗华。，李小刚(1．重庆医科大学附属第一医院神经内科400016；2．泸州医学院附属医院神经内科，四川泸州646000)摘要：目的探讨米诺环素对大鼠嗜铬细胞瘤细胞(PC12)缺氧缺糖(OGD)损伤后细胞存活率及神经突生长的影响。方法分别缺氧缺糖2、4、6h及8h建立PC12细胞oGD损伤模型，将细胞分为正常对照组

2、，OGD组和不同浓度的(0．1、1．0／,M和10．0M)米诺环素治疗组，在缺氧缺糖／复氧24h后，用CCK一8法检测细胞存活率，免疫荧光法标记MAP一2并在荧光显微镜下观察神经突的生长，Westernblot法检测各组GAP一43蛋白的表达水平。结果与0GD组比较，米诺环素能显著提0GD后PC12细胞的存活率[(46．1±2．9)vs．(77．0士2．5)，P<0．oi]，促进PC12细胞OGD损伤后神经突的生长，同时上调轴突再生蛋白GA43的表达[(0．344-0．04)vs．(2．11士0．10)，P

3、。结论米诺环素能减轻0GD损伤所致PC12细胞的死亡，并促进细胞神经突的生长。关键词：米诺环素；神经突生长；氧糖剥夺；PC12细胞中图分类号：R743．31文献标识码：A文章编号：1671-8348(2015)05—0605—03EffectsofminocyclineonneuriteoutgrowthofPC12cellsfollowingoxygenglucosedeprivationTaoTao，QinXinyue，FengJinzhou，LuoHua，LiXiaogang(1．Department0_，Neu

4、rology，theFirstAffiliatedHospitalofChongqingMedicalUniversity，Chongqing400016，China；2．DepartmentofNeurology，theAffiliatedHospitalofLuzhouMedicalCollege，Luzhou，Sichuan646000，China)Abstract：0bjectiveToinvestigatetheeffectsofminocyclineoncellviabilityandneuriteoutg

5、rowthofpheochromocytomacells(PC12)afteroxygen—glucosedeprivation(OGD)injury．MethodsPC12cellswereexposedtoOGDinsultfor2，4，6，8htoestab—lishacerebralischemiamode1invitro．High—differentiatedPC12cellswerecultivatedandrandomlydividedintothreegroups：con—trolgroup，OGDgr

6、oupandvariousdosesofminocycline(0．1，1．0，10．0“M)treatedgroup．24hafterOGD-reperfusion，PC12cellsviabilitywasassessedbvCCK-8assay，theneuritewaslabeledwithMAP一2byimmunofluoresceneeandneuritelengthwasmeas—uredbytheImage—ProPlus7．0software，GAP_43proteinexpressionwasdet

7、erminedbyWesternblotting．ResultsComparedtotheOGDgroups，minocyclineinducedaconcentration-dependentincreaseincellsviability[-(46．1士2．9)vs．(77．0士2．5)，P<0．o1-1，improvedneuriteoutgrowthandincreasedtheexpressionofGAP一43proteininPC12ceilsafterOGDinjury(E(o．34±o．04)vs．(

8、2．114-0．10)，P<0．01]．ConclusionMinocyclinecouldprotectagainstoxygenglucosedeprivationi~uryandpromoteneuriteoutgrowth．Thisfindingsuggestsminocyclinemaybeanove1therapyfo