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《atra和9-cis-ra对缺氧缺糖损伤pc12细胞凋亡的影响》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在工程资料-天天文库。
1、ATRA和9-cis-RA对缺氧缺糖损伤PC12细胞凋亡的影响1211111111江伟,温恩懿,龚敏,瞿平,毕杨,张赟,魏小平,刘友学,陈洁,李廷玉(400014重1庆,重庆医科大学附属儿童医院儿童营养中心,儿童发育疾病省部共建教育部重点实验室;400037重庆,第三军医大学新桥医2院儿科)[摘要]目的探讨不同构型视黄酸(retinoidacid,RA)对缺氧缺糖损伤的PC12细胞凋亡的影响,且通过何种受体途径作用。方法倒置显微镜观察缺氧缺糖损伤前后细胞形态变化,流式细胞术研究分别经不同浓度全反式视黄酸(all-transreti
2、noicacid,ATRA)和9顺式视黄酸(9-cis-retinoicacid,9-Cis-RA)刺激的缺氧缺糖损伤PC12细胞凋亡水平的差异。ELISA监测ATRA和9-Cis-RA处理4h后PC12细胞的LDH释放水平以了解其细胞膜损伤水平的差异。结果ATRA组细胞凋亡率在1µmol/L浓度时与未刺激组无显著差异(P>0.05),从5µmol/L起随着浓度的增高凋亡率显著增高(P<0.05),在10、20µmol/L浓度组均显著高于相同浓度的9-Cis-RA组(P<0.05)和未刺激组(P<0.05);而9-Cis-RA在2
3、0µmol/L组凋亡率低于未刺激组,但无显著性(P>0.05)。乳酸脱氢酶(LDH)释放水平在ATRA刺激组从5µmol/L起随浓度的增高而显著性增高(P<0.01),在5、10、20µmol/L浓度均显著高于未刺激组和9-Cis-RA组(P<0.05),而在各浓度9-Cis-RA组与未刺激组均无显著性差异(P>0.05)。在RA信号系统中ATRA特异激活retinoicacidreceptors(RARs),而9-Cis-RA同时激活RARs和retinoidXreceptors(RXRs)。结论在缺氧缺糖损伤的PC12细胞AT
4、RA可通过激活RARs受体途径发挥促凋亡效应,但这种效应可以被激活RXRs受体途径而抑制。[关键词]全反式视黄酸;9顺式视黄酸;视黄酸核受体;视黄醇X受体;PC12细胞;缺氧缺糖;凋亡[中图法分类号]R345.5;R730.263[文献标志码]AATRAand9-cis-RAeffectapoptosisinPC12cellforOGDinjuryJIANGWei1,WENEnyi2,GONGMin1,QUPin1,BIYang1,ZHANGYun1,WEIXiaoping1,LIUYouxue1,CHENJie1,LITingy
5、u1(1Children’sHospital,ChongqingUniversityofMedicalSciences,Chongqing,400014,2Departmentofpediatrics,XinqiaoHospital,ThirdMilitaryMedicalUniversity,Chongqing,400037,China)[Abstract]ObjectiveToinvestigatehowdifferentRAconfigurationsaffectapoptosisinPC12cellsforoxygenan
6、dglucose-deprivation(OGD)injury,andwhichdoesthereceptorpathwayplaythebiologicaleffect?MethodsWeobservedcellmorphologybeforeandafterOGDinjurywithinvertedmicroscope,andstudiedapoptosisrateofPC12cellsinOGDinjurywithdifferentconcentrationsofATRAand9-Cis-RAstimulatedbyflow
7、cytometry.Finally,weinvestigatedtheLDHreleaseinPC12cellsbyELISAafter4hoursRAtreatment,tounderstandthelevelofmembranedamage.ResultsWefoundthatATRAstimulationin1μmol/Lgroupdoesnotdifferwiththatof0μmol/Lgroup(P≥0.05),buttheapoptosisratearesignificantincreasingfrom5μmol/L
8、to20μmol/L(P≤0.05).Theapoptosisratesin10μmol/l,20μmol/Lgroupsweresignificantlyhigherthanthatofthe9-Cis-RAgroupswithsamestimu