牛传染性鼻气管炎病毒的分离鉴定及gD基因序列分析.pdf

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1、安徽农业科学，JournalofAnhuiAgri．Sci．2013，4l(6)：2477—2479责任编辑陈玉敏责任校对卢瑶牛传染性鼻气管炎病毒的分离鉴定及gD基因序列分析杨有武(青海省海北藏族自治州海晏县兽医站，青海海晏8l22o0)摘要[目的]从疑似牛传染性鼻气管炎病毒感染的牛鼻腔棉拭子中分离出l株病毒，对其进行鉴定和序列分析。[方法]从疑似牛传染性鼻气管炎病毒感染的牛鼻腔棉拭子中分离到l株病毒，将其命名为NM株。通过PCR、MDBK细胞病变观察、中和试验、动物回归试验、gD基因序列分析对其进行鉴定。[结果]确定该分离株为牛传染性鼻气管炎病毒强毒株。NM株

2、病毒能使MDBK细胞产生牛传染性鼻气管炎病毒典型性细胞病变。Reed—Muench法测定NM株病毒的TC／D为10。／ml。NM株病毒与IBRV阳性血清发生中和反应，而与IBRV阴性血清不发生中和反应。NM株病毒能使8月龄IBRV抗体阴性牛致病，表现出牛传染性鼻气管炎的典型临床症状。gD基因序列鉴定结果表明NM株病毒与IBRVK22株的同源性最高。f结论]该研究可为IBR诊断试剂与疫苗的研制奠定基础。关键词牛传染性鼻气管炎病毒；分离；序列；鉴定中图分类号S852．653文献标识码A文章编号0517—6611(2013)06—02477—03Isolation，I

3、dentificationandSequenceAnalysisofgOGeneofInfectiousBovineRhinotraeheitisVirusYANGYou-WU(HaiyanVeterinaryStationinHaibeiPrefectureofQinghaiProvince，Haiyan，Qiughai812200)Abstracti0biective]Theresearchaimedtoisolateastrainofvirusfromnasalswabsamplesofcattlewhichmightbeinfectedbyinfecti

4、ousbovinerhinotracheitis(IBR)andmaketheidentificationandsequencinganalysis．1MethodIAstrainofviruswasisolatedfromnasalswabsamplesofcattlewhichmightbeinfectedbyinfectiousbovinerhinotracheitis(IBR)anditwasnamedasNMstrain．Theisolatedstrainwasi-dentifiedbyPCR，MDBKcelllesionobservation，neu

5、tralizationtest，animalregressiontestandgDgenesequenceanalysis．[Result]Theiso-latedstrainwasconfirmedasvirulentstrainofinfectiousbovinerhinotracheitisvirus．NMstrainmadeMDBKcel1toproducetypicalcelllesionofinfectiousbovinerhinotracheitisvirus．TC／DofNMstraindeterminedbyReed—Muenehmethodw

6、as1O／m1．NMstraincouldmakeneu—tralizationtestwithIBRVpositiveserum．butitdidn’treactwithIBRVnegativeselxlm．IBRVantibody．flreecalveswi出theageof8monthsshowedtypicalclinicalsymptomsofIBRafterinoculationofNMstrain．ThesequencinganalysisresultsshowedthatthenucleotidehomologybetweenNMstrainan

7、dK22strainofIBRV．IConclusionlI’heresearchlaidthefoundationfordevelopingthediagnosisreagentanditsvaccineofIBR．KeywordsInfectiousbovinerhinotracheitisvirus；Isolation；Sequence；Identification牛传染性鼻气管炎(Infectiousbovinerhinotracheitis，剂盒为北京百泰克生物技术有限公司产品。IBR)是由牛传染性鼻气管炎病毒(Infectiousbovinerhin

8、otra—1．3临床症状