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《牛传染性鼻气管炎病毒三基因缺失突变株的构建.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、中国科技论文在线http://www.paper.edu.cn牛传染性鼻气管炎病毒三基因缺失突变株#的构建1,22,311,2,3**李程，陈颖钰，索朗斯珠，郭爱珍5（1.西藏大学农牧学院动物科学学院，西藏林芝860000；2.华中农业大学动物医学院，湖北武汉430070；3.华中农业大学农业微生物学国家重点实验室，湖北武汉，430070）摘要：牛传染性鼻气管炎是由牛疱疹病毒Ⅰ型（BoHV-1）引起的一种牛的传染病，可导致10严重的经济损失。疫苗接种是用于防控该病的重要手段，但现有疫苗在多个方面都有改进的余地。本实验利用pBoHV-1BAC载体和
2、四次RedE/T重组，依次构建了BoHV-1gN（-CT-）、BoHV-1gN-（CT-30-32-）、BoHV-1gN-TK-和BoHV-1gN-TK-gG-基因缺失突变株，其中gN缺失了胞外区30-32位氨基酸、胞质尾区CT端，TK基因缺失了1079bp，gG基因缺失了1335bp。pBoHV-1gN-TK-gG-经磷酸钙法转染MDBK细胞后，出现细胞病变，成功15拯救出三基因缺失病毒株BoHV-1gN-TK-gG-。研究结果为牛传染性鼻气管炎新型基因缺失标记疫苗的开发奠定了基础。关键词：牛传染性鼻气管炎；牛疱疹病毒I型；基因缺失疫苗；gN；
3、TK；gG中图分类号：请查阅《中国图书馆分类法》20ConstructionofaTripleGeneDeletedMutantBoHV-1gN-/TK-/gG-1,22,311,2,3LiCheng,ChenYingyu,Suolangsizhu,GuoAizhen(1.CollegeofAnimalScienceofXiZangAgriculturalandAnimalHusbandryUniversity,TibetLinzhi860000;252.CollegeofVeterinaryMedicine,HuazhongAgricultur
4、alUniversity,HubeiWuhan430070;3.StateKeyLaboratoryofAgriculturalMicrobiology,HuazhongAgriculturalUniversity,HubeiWuhan,430070)Abstract:BovineinfectiousrhinotracheitisisabovineinfectiousdiseasecausedbybovineherpesvirustypeI(BoHV-1),whichcanleadtoseriouseconomiclosses.Vaccinati
5、onisanimportantmeanto30preventandcontrolthisdisease.However,thecurrentvaccinesremaintobeimprovedinmanyways.Inthisstudy,BoHV-1gN-（CTnull）、BoHV-1gN-（CT/30-32null）、BoHV-1gN-TK-andBoHV-1gN-TK-gG-weresequentiallyconstructedbyusingpBoHV-1BACvectorandfourroundsofRedE/Trecombination.
6、ThegNwasdeletedofextracellulardomain(including9bp),thepartofcytoplasmictail(CT)(covering7bp),whileTKgenewasdeletedof1079bp,andgGgeneof1335bp.TheMDBK35cellsweretransfectedbythefinalrecombinantplasmidpBoHV-1gN-TK-gG-withcalciumphosphatemethodandthevirusreplicationwasobservedint
7、hecellsshownbygreenfluorescenceindicatingthattheviralmutantBoHV-1gN-TK-gG-wassuccessfullyrescued.Thisresultprovidesthebasisforfurtherdevelopmentofnovelvaccinewithtriplegenedeletedmarkeragainstbovineinfectiousrhinotracheitis.40Keywords:IBR；BoHV-1；gene-deletedvaccine；gN；TK；gG基金
8、项目：高校博士点基金（项目编号：20130146110003）；现代农业（肉牛/牦牛）产业技术体系专项资金（项目编号：CARS-38）；
