非酒精性脂肪性肝病细胞模型研究进展.pdf

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1、中西医结合肝病杂志2014年第24卷第6期·383·doi：10．3969／j．issn．1005-0264．2014．06．024非酒精性脂肪性肝病细胞模型研究进展肖铁刚，陈塘明彭文波。孟胜喜宋海燕季光王兵1．上海中医药大学研究生院(上海，201210)2．上海交通大学附属第六人民医院中医科3．上海中医药大学脾胃病研究所摘要笔者对非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)细胞模型从干预条件和细胞系两方面进行了综述，介绍了多种NAFLD细胞模型的造模方法及各自的优缺点。细胞模型较动物模型具有个体差异小、影响因素少、实验条件可控性强等优点，可弥补

2、动物实验的不足，更好地配合NAFLD临床研究。未来研究中要探索、建造能够更好的反映NAFLD发病的病理生理学动物模型。同时将细胞模型与动物模型相互联系起来，使两种模型相互补充，共同促进NAFLD发病机制及防治药物的研究。关键词非酒精性脂肪性肝病；体外模型；细胞系非酒精性脂肪性肝病(nonalcoholicfattyliverdisease，多采用高脂培养基造模，形成典型的非酒精性脂肪变肝细胞NAFLD)是一种与胰岛素抵抗(insulinresistance，IR)和遗模型。在NAFLD细胞模型的研究中以添加脂肪酸为最常见的传易感密切相

3、关的代谢应激性肝脏损伤，以肝细胞脂肪变性方法，而根据NAFLD的疾病特点所添加的多为游离脂肪酸。和脂肪蓄积为病理特征，但无过量饮酒史的临床综合征。疾不同实验及所用体外肝细胞的不同，导致所用脂肪酸的浓度病谱包括非酒精性单纯性脂肪肝(nonalcoholicsimplefattyliv—有所不同。YasuyukiOkamoto等⋯用1mmol／L油酸培养人肝er，NAFL)、非酒精性脂肪性肝炎(nonalcoholicsteatohepati-癌细胞HepG224h后，肝细胞内脂滴明显增多，细胞内的甘tis，NASH)及其相关肝硬化和肝细

4、胞癌-3]。NAFLD是2l油三酯和载脂蛋白B含量明显增加，肝细胞脂肪变模型建立世纪全球重要的公共健康问题之一，亦是我国愈来愈重视的成功。另一实验则对人肝细胞HuH7以不同脂肪酸来进行慢性肝病问题j。近年来的流行病学调查显示：NAFLD影响干预造模。实验使用了硬脂酸(C18：0)、油酸(C18：1)、亚着全球范围内大于20％的人群J，西方发达国家普通人群患油酸(C18：2)、软脂酸(C16：0)、十四烷酸(C14：0)和十病率为20％～30％，肥胖或糖尿病人群中达到70％一二烷酸(C12：0)，发现长链脂肪酸有利于脂滴在细胞内蓄积。9

5、0％_6]。在亚洲国家，NAFLD增长迅速且呈低龄化发病趋同时实验还对不同剂量的油酸造模效果进行了比较。在0～势，我国的上海、广州和香港等发达地区成人NAFLD患病率1．2mmol／L的范围内，细胞内的甘油三脂的量随着油酸浓度在15％左右，NAFLD已成为我国仅次于病毒性肝炎的第二的增加而增加。该造模的方法解决了脂肪酸溶于培养液的问大肝病。题，从而保证了所加入的脂肪酸的浓度。M．TeresaDonato在NAFLD的基础研究中多通过动物模型来实现。然而，等将肝细胞培养在含有不同浓度(0．25—3mmol／L)的长动物模型存在一些缺点(

6、如动物个体差异大，实验条件难于链游离脂肪的培养基中14h，细胞内脂滴的数量与培养基中长控制，实验结果易受影响等)，细胞模型个体差异小，影响因链游离脂肪的浓度成正比。Gomez．Lechon等用不同比例的素少’]，实验条件可控性强。为弥补动物模型的不足，能饱和脂肪酸和不饱和脂肪酸来培养HepG2细胞和人肝细胞。够更好的配合NAFLDI临床研究，更深入、全面探索其发病机实验发现，当油酸和软脂酸以2：1结合时，仅引起轻微的细制，筛选防治NAFLD的有效药物，建立一种细胞模型是十分胞毒性和细胞凋亡，可以用来复制长期的细胞脂肪生成的模必要的。经

7、过国内外众多学者的努力，目前已建立了多种型。当油酸和软脂酸以0：3结合时，则可形成细胞的急性损NAFLD细胞实验模型。现综述如下。伤从而引起脂肪的大量聚集。1不同干预条件的细胞模型1．2不合脂肪酸的高脂培养基部分研究在建造NAFDL细1．1高脂培养基众多的国内外实验研究中，NAFDL模型胞模型时未使用含有脂肪酸的高脂培养基，如在培养基中添·基金项目：上海市中西医结合学会科研基金课题(No．zxyk一1205)；上海市中医药事业发展三年行动计划(重大研究)项目子课题(No．ZYSNXD—CC—ZDYJ042-02，ZYSNXD—CC—Z

8、DYJ042-06)；上海市卫生局中医药科研基金资助项目(No．20081．011A，2010LO60A)；A通讯作者，E—mail：bingliver@163．corn。·384·中西医结合肝病杂志2014年第24卷第