中麻黄基因组DNA不同提取方法的比较.pdf

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1、第18卷第11期，中国实验方剂学杂志Vo1．18．No．112012年6月ChineseJournalofExperimentalTraditionalMedicalFormulaeJun．，2012中麻黄基因组DNA不同提取方法的比较朱田田一，晋玲，，杜伎，陈红刚，张延红，王惠珍，王艳(1．甘肃中医学院，兰州730000；2．甘肃省高校中(藏)药化学质量研究省级重点实验室，兰州730000)[摘要]目的：比较不同DNA提取方法，选择最适于中麻黄基因组的方法。方法：采用改良CTAB，SDS法、试

2、剂盒法提取中麻黄基因组DNA；用琼脂糖凝胶电泳法和紫外分光光度法检测所得总DNA的得率和纯度，并进行ISSR—PCR扩增检测。结果：3种方法均可从新鲜中麻黄中提取出产量较高的基因组DNA，但其中改良CTAB法提取的总DNA纯度高，质量好，扩增产物的电泳条带也较明显；SDS法和试剂盒法提取的总DNA质量差，不适用于下游分子生物学实验。结论：改良十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)法为中麻黄基因组DNA提取的最佳方法，该方法提取的基因组DNA适用于中麻黄基因组PCR扩增和其他分子生物学研究。[关键词]中

3、麻黄；DNA提取；十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)法．[中图分类号]R284．1[文献标识码]A[文章编号]1005—9903(2012)11一o125．04[DOI]CNKI：11—3495／R．20120327．2700．019[网络出版时间]201203—2717：06[网络出版地址]http：／／www．cnki．net／kcms／detail／11．3495．R．20120327．1706．019．htmlComparisonofDifferentMethodsforExtractio

4、nofGenomicDNAfromEphedraintermediaZHUTian—tian，删Ling'，DUTao一，CHENHong—gang一，ZHANGYah—hong，WANGHui．zhen一，WANGYah’(1．GansuCollegeofTraditionalChineseMedicine，Lanzhou730000，China；2．KeyLaboratoryofChemistryandQualityforTraditionalChineseMedicinesoftheCol

5、legeofGansuProvince，Lanzhou730000，China)[Abstract]0bjective：BycomparingdifferentextractionmethodsofgenomicDNA，thebestextractionmethodof印hedraintermediagenomicDNAwasselected．Method：Improvedcetyhrimethylammoniumbromide[收稿日期]20111202(014)[基金项目]科技基础性工作专项

6、重点项目子课题(SB2007FY020)；甘肃教育厅科研项目(I106B-07)；甘肃中医学院中青年科研基金项目(ZQ201112)[第一作者]朱田田，硕士，讲师，从事中药资源开发与利用研究，Tel：13088731903，E-mail：ztt0935@163．corn[通讯作者]晋玲，博士，副教授，从事药用植物资源可持续利用研究，Tel：0931—8765335，E-mail：jinl@gszy．edu．cn‘兰瑞芳，冯珊．闽产罗勒油化学成分的研究[J]．海峡[18]张文成，宋宗庆，李春保．疏

7、毛罗勒挥发油超临界流药学，2001，13(1)：51．体萃取的研究[J]．农产品加工，2006(10)：81．卢汝梅，李耀华．桂产罗勒挥发油化学成分的分析[19]张帅，徐云辉，张建斌，等．不同来源罗勒挥发油成分[J]．广西植物，2006，26(4)：456．的GC-MS法分析及体外抗菌活性[J]．中国医药工徐洪霞，潘见，杨毅，等．疏毛罗勒挥发油化学成分的业杂志，2011，42(6)：419．研究[J]．香料香精化妆品，2004(3)：5．[2O]胡西旦·格拉吉丁．气相色谱一质谱法分析罗勒中挥何道

8、航，庞义，李广宏，等．粤产紫罗勒精油的化学成发油的化学成分[J]．光谱实验室，2008，25(2)：127．分研究[J]。广西植物，2005，25(1)：9O．[21]汪涛，崔书亚，胡晓黎，等．罗勒挥发油成分研究[J]．宋述芹，谷茂，陈飞鹏，等．固相微萃取气质联用分析中国中药杂志，2003，28(8)：740．罗勒花和叶的挥发性成分[J]．质谱学报，2008，29[责任编辑邹晓翠](2)：l10．·125·第18卷第11期中国实验方剂学杂志Vo1．18．No．112012年6月ChineseJo