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《不同方法提取中麻黄基因组dna的比较研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、不同方法提取中麻黄基因组DNA的比较研究朱田田1，2，晋玲1，2*，杜弢1，2，陈红刚1,2，张延红1,2，王惠珍1,2，王艳1,2（1.甘肃中医学院，甘肃兰州730000；2.甘肃省高校中（藏）药化学质量研究省级重点实验室，甘肃兰州730000）摘要：目的比较不同DNA提取方法，选择最适于中麻黄基因组的方法，为其后续分子生物学实验奠定基础。方法采用改良CTAB法、SDS法、试剂盒法提取中麻黄基因组DNA；用琼脂糖凝胶电泳法和紫外分光光度法检测所得总DNA的得率和纯度，并进行ISSR-PCR扩增检测。结果3种方法均可从新鲜中麻黄中提取出产量较高的基因组DNA,但其中改良
2、CTAB法提取的总DNA纯度高，质量好，扩增产物的电泳条带也较明显；SDS法和试剂盒法提取的总DNA质量差，不适用于下游分子生物学实验。结论改良CTAB法为中麻黄基因组DNA提取的最佳方法，该方法提取的基因组DNA适用于中麻黄基因组PCR扩增和其他分子生物学研究。关键词:中麻黄；DNA提取；CTAB法TheComparativeStudyofDifferentMethodsforExtractionofGenomicDNAfromEphedraintermediaZHUTian-tian1，2,JINLing1，2*,DUTao1，2,CHENHong-gang1，2,
3、ZHANGYan-hong1，2,WANGHui-zhen1，2,WANGYan1，2（1.GansuCollegeofTraditionalChineseMedicine,Lanzhou,730000；2.KeylaboratoryofChemistryandQualityforTraditionalChineseMedicinesoftheCollegeofGansuProvince，Lanzhou，730000）Abstract:ObjectiveBycomparingdifferentextractionmethodsofgenomicDNA,thebestex
4、tractionmethodofEphedraintermediagenomicDNAwasselected,whichcanbeobtainedforlatermolecularresearch.MethodImprovedCTABmethod,SDSmethod，kitmethodwasusedfortheextractionofgenomicDNAfromEphedraintermedia；TheyieldandpurityoftotalgenomicDNAwereexaminedbyagarosegelelectrophoresis,UV-spectrophot
5、omoterandISSR-PCR.ResultThreeextractionmethodscouldextractedthehighamountgenomicDNAfromfreshtissueofEphedraintermedia．ImprovedCTABmethodcouldyieldedhighestpuritytotalDNA,andtheelectrophoreticbandsofamplifiedproductswereobvious；Ontheothersides,SDSmethodandkitmethodindicatedlowpurityofthey
6、ieldedDNAandcouldnotbeusedindownstreamapplicationdirectly.ConclusionTheimprovedCTABmethodisthebestofthethreecomparedmethodsforextractingthegenomicDNAfromEphedraintermedia，whichissuitableforPCRreactionandothermolecularresearchinEphedraintermediagenomicDNA.Keywords:Ephedraintermedia；DNAext
7、raction；CTABmethed麻黄（HerbalEphedrae）是中医临床常用中药,具有发汗解表，宣肺平喘等功效。被《中华人民共和国药典》收录的麻黄属植物只有3个种，其中的中麻黄（EphedraintermediaSchrenketC.A.Mey）在甘肃省分布最广，品质优良。因近年来国内外对麻黄碱需求量的猛增，使人们对我省中麻黄进行掠夺式采挖，导致目前其天然资源已遭严重破坏，因此甘肃省中麻黄资源可持续性利用和保护工作势在必行﹝1-4﹞。近年来，分子生物技术已在药用植物资源利用与保护方面得到广泛应用，而进行任何分子生物学研究的首要环
