浙贝母基因组DNA提取方法比较研究【开题报告】

浙贝母基因组DNA提取方法比较研究【开题报告】

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1、毕业论文开题报告生物工程浙贝母基因组DNA提取方法比较研究1.课题研究意义及国内外研究现状浙贝母属百合科,种类繁多。主要分布在江苏南部、浙江北部和湖南,也分布于日本。浙贝母是用于止咳化痰的常用中药,是著名的“浙八味”之一,其药用成分为生物碱。我国贝母的出口中浙贝母占了全国贝母总产量的40%。同时浙贝母是贝母族中个体最大的一种,浙贝母主要分布在樟溪河及鄞江流域两岸,主产区是章水、鄞江两镇,龙观乡也有少量种植。本文分别以取自宁波市鄞州区章水的狭叶浙贝、宽叶浙贝、多籽浙贝叶片为材料,分别采用CTAB法、SDS法、高盐低pH法和

2、试剂盒法来提取浙贝母基因组DNA,并通过琼脂糖凝胶电泳、紫外分光光度计、PCR扩增对所提取的DNA样品进行纯度和浓度及完整性检测,以寻找适合浙贝母基因组DNA的提取方法。近三年来,浙贝母的价格一直回落,使得农户种植的信心也跟着回落,而贝母的药用价值并不改色,因此研究浙贝母的生物学活性,鉴定浙贝母品种优良性显得十分重要。目前国内已有采用分子生物学方法鉴定药用贝母的报道,同时也有对贝母进行同工酶的研究等等。但对浙贝母基因组DNA的提取方法研究报道较少。本文在浙江宁波鄞州区章水、龙观、鄞江、金华磐安等地分别采集了相同品种的浙贝

3、母鳞茎,在鄞州区的章水采集了狭叶浙贝、宽叶浙贝、多籽浙贝三个不同品种的浙贝母的地上茎及叶。本文主要就是研究采用多种方法从中药材浙贝母的新鲜叶片中提取基因组DNA,并且对这些方法进行比较,从中找出更为适宜的简单易操作的方法。这个研究也为开展浙贝母种质资源的遗传多样性分析以及对其分子鉴定奠定了基础。2.课题研究的主要内容、预期目标和研究方案主要内容:(1)以不同浙贝母品种叶片为材料,进行材料预处理(烘干或液氮研磨);(2)采用SDS法、酸碱法、改良CTAB法和试剂盒提取法进行浙贝母基因组DNA提取方法比较研究;(3)进行数据

4、处理与分析,确定最佳提取方法(4)对浙贝母基因组DNA进行PCR扩增。预期目标:(1)浙贝母不同品种、产地间理化性质的比较,为不同品种的鉴定提供辅助依据。(2)撰写毕业论文研究方案:不同品种、不同产地的浙贝母试剂盒法高盐低PH法SDS法CTAB法电泳验证OD值测定比较不同方法提取浙贝母DNA基因组的质量3.课题进度计划2010年5月至2010年6月:收集相关资料,熟悉实验步骤;2010年7月至2010年8月:实验准备,开展预备实验;2010年9月至2011年1月:比较不同提取方法对浙贝母基因组DNA质量的影响;2011年

5、2月至2011年3月:完成实验资料的整理、论文撰写与修改。4.参考文献[1]赵树进,陈念,严萍.中药材生物多样性及核酸分析技术[M].北京:科学出版社,2009:61-88.[2]高文远,李志亮,肖培根.浙贝母基因组DNA的提取与分析[J].中国中药杂志,1998,23(2):79-81[3]段中岗,黄琼林,杨锦芬等.适合中药材DNA条形码分析的DNA提取方法的研究[J].中药新药与临床药理,2009,20(5):480-484.[4]王培训,黄丰,周联.植物中药材总DNA提取方法的比较[J].中药新药与临床药理,199

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7、李军集,廖和发,刘海龙.药用植物六角莲基因组DNA提取方法[J].广西林业科学,2007,36(2):88-91.[10]程纪伦,范爱辉,陈琦.高质量天麻基因组DNA的提取[J].广东农业科学,2009,8:153-155.[11]程世平,施江,史国安等.黄连木叶片基因组DNA提取方法[J].河南科技大学学报(自然科学版),2010,31(3):71-75.[12]庞玉新,王文全,张影波等.药用植物艾纳香基因组DNA提取方法研究[J].广西植物,2009,29(6):763-767.[13]刘紫英,袁斌.香水百合基因组D

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