提取玫瑰基因组DNA几种方法的比较.pdf

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1、震擘学握2014,4(9):59—64JournalofAgricultureWWW.caaj.org提取玫瑰基因组DNA几种方法的比较王玉,贾锦山,张娜娜,赵兰勇(山东农业大学林学院,山东泰安271018;菏泽市园林处,山东菏泽274000)摘要:为了找到一种方便、快捷且经济高效的玫瑰叶片基因组DNA提取方法,为玫瑰后期的分子生物学研究奠定良好基础,以不同品种的玫瑰幼嫩叶片为材料,分别利用CTAB法、SDS法、改良CTAB法、试剂盒法4种方法提取玫瑰基因组DNA,经过琼脂糖凝胶电泳、紫外分光光度法对所提DNA的质量和产量进行检测比较。结

2、果表明:4种方法均可从玫瑰叶片中提取到DNA,改良CTAB法作为对常规方法的改进,在保证经济实用的前提下提取到的DNA质量最好,浓度最高;而试剂盒法作为一种快速提取植物基因组DNA的新兴方法,虽然产量略低,费用略高,但操作步骤简单,耗时短,毒害小,高效快捷。各实验室可根据实际情况选择适宜的方法。关键词:玫瑰;DNA提取;CTAB法;SDS法;改良CTAB法;试剂盒法中图分类号:$688.9文献标志码:A论文编号:2014—0054ComparisonofSeveralMethodsinGenomicDNAExtractionfromRos

3、arugosaWangYu,JiaJinshan,ZhangNana,ZhaoLanyongfCollegeofForestry,ShandongAgriculturalUniversity,Tai’an271018,Shandong,China;2LandscapeManagementOficeofIteze,Heze274000,Shandong,China)Abstract:Inordertofindaconvenient,fastandcost—effectivegenomicDNAextractionmethodandlayag

4、oodfoundationforthestudyofRosarugosa,itsgenomicDNAwasextractedfromyoungleavesofdifferentvarietiesofRosarugosawithCTABmethod,SDSmethod,modifiedCTABmethodandDNAminprepkitmethod.ThequalityandquantityoftheextractedDNAwastestedandcomparedbymeansofagarosegelelectrophoresisandUV

5、specterphotometry.TheresultsshowedthatDNAcouldbeextractedwithallthefourmethods,butasanimprovedmethod,modifiedCTABmethodcouldextractDNAofthebestqualityandthehighestconcentrationunderthepremiseofbeingeconomicalandpractica1.However,DNAminprepkitmethodwasanewmethodofDNArapide

6、xtraction.Thismethodhaddisadvantagesofloweryieldandhighercost,buthadadvantagesofsimpleroperation,shortertime,lowertoxicity,highereficiencyandfaster.Asuitablemethodcouldbechosenaccordingtotheactualconditionsofthelabs.Keywords:Rosarugosa;DNAExtraction;CTABMethod;SDSMethod;M

7、odifiedCTABMethod;DNAMinprepKitMethod0引言位与克隆、遗传转化和遗传多样性分析u。等研究的重DNA作为生物遗传信息的载体,是重要的生物信要基础。因此,能否快速且高质量的提取到植物基因息分子。提取高质量的DNA分子是对植物基因组进组DNA将直接关系到整个试验的成败。目前,国内外行分子生物学如分子标记辅助育种、图谱构建、基因定对此方面的研究都已有不少。常用的DNA提取方法基金项目:山东省农业良种工程资助项目“高档园林花卉良种选育”[鲁科农字(2009)103号】。第一作者简介:王玉,女,1990年出生,山东

8、淄博人,在读硕士,研究方向为园林植物造景。通信地址:271018山东省泰安市岱宗大街61号山东农业大学林学院,E.mail:532836481@qq.tom。通讯作者:赵兰勇,男,1960年出

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