五味子乙素抗顺铂所致HK-2凋亡及其机制的研究-论文.pdf

《五味子乙素抗顺铂所致HK-2凋亡及其机制的研究-论文.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在应用文档-天天文库。

1、中国药理学通报ChinesePharmacologicalBulletin2014Jul；30(7)：961～4·961·网络出版时间：2014—6—2416：35网络出版地址：http：／／www．cnki．net／kcms／doi／10．3969／j．issn．1001—1978．2014．07．017．html五味子乙素抗顺铂所致HK-2凋亡及其机制的研究王嫣虹，徐翔(浙江大学医学院附属第二医院滨江院区药3,1科，浙江杭州310009)doi：10．3969／j．issn．1001—197

2、8．2014．07．017化疗中的不良反应提供研究思路。文献标志码：A文章编号：1001—1978(2014)07—0961—041实验材料中国图书分类号：R284．1；R322．61；R329．25；R979．11．1细胞与药物人肾皮质近曲小管上皮细胞摘要：目的研究五味子乙素(SchB)对顺铂所致HK-2(。肾HK．2(CODO．CO．LTD，货号COD0-0183)。受试药小管上皮细胞)损伤的保护作用，并探讨其可能的机制。方物：顺铂(Sigma，货号479306)、五味子乙素(SchB，法不

3、同浓度的SchB和顺铂作用于HK-2，在倒置显微镜下纯度>99％)观察细胞形态变化，流式细胞仪检测HK-2细胞凋亡，并检1．2实验试剂DMEM／F12培养基(Gibco，测细胞LDH(乳酸脱氢酶)、MDA(丙二醛)、LPO(脂质过氧化物)的改变，探讨SchB对HK-2保护作用的机制。结果Lotl171657)、0．25％胰酶、PBS缓冲液、双抗(吉诺顺铂有抑制HK-2生长、诱导其凋亡的作用Ic。为18．39生物公司)、胎牛血清(杭州四季青)、二甲基甲酰胺mo1．L～，而20Ixmol·L的Sch

4、B能够明显减少顺铂引(Sigma)、AnnexinV．FITC细胞凋亡检测试剂盒(凯起的HK-2的凋亡，保护作用最强；SchB能使顺铂导致的细基生物，KGA107)、细胞丙二醛MDA测试盒(南京胞MDA、LPO、LOH升高有明显降低。结论五味子乙素能建成，20121121)、乳酸脱氢酶LDH测试盒(南京建够有效的抑制顺铂引起HK-2的凋亡。机制可能是通过其成，20121116)、脂质过氧化物LPO测试盒(南京建抗氧化作用来抑制顺铂引起的氧化应激反应。成，20121122)。2方法关键词：五味子乙

5、素；顺铂；肾毒性；HK-2；细胞凋亡；氧化应2．1细胞的准备将HK-2计数传代至96孔板，激5％CO：、37~C培养箱中孵育至对数生长期，取出待测。五味子乙素(schisandrinB，SchB)是木兰科植2．2药物的配制将顺铂和SchB纯品用少量二甲物北五味子或华中五味子的干燥成熟果实中木脂素基甲酰胺溶解成母液，试验时用不含血清和双抗的类有效成分之一，是一种抗氧化能力很强的中药单DMEM／F12培养基稀释，配成80、40、20、10、5、2．5、体，具有较强的抗自由基和组织非特异性抗氧化损1．

6、25、0．625m01．L的顺铂药液；40、20、5p~mol伤作用卜。·L的SchB药液。联合用药：顺铂Ic。分别和顺铂(cisplatin)是目前临床常用的广谱抗癌SchB40、20、10、5、2．5p．mol·L混合给药。药，广泛用于各种实体瘤的治疗，但是其肾毒性明2．3顺铂IC。的测定设9组(8个浓度梯度加正显，极大制约了其临床应用J。因此，有效防治顺常细胞对照)，每~LTJtJ人顺铂药液200l，每组8孔。铂的肾毒性是化疗过程中亟待解决的问题。研究表作用24h后弃去上清，每孔加入100

7、Ixl培养基和明，氧化应激损伤可能是顺铂肾毒性的主要原因，20lMTS，孵育2h后，酶标仪490rim处测定各孔表现在顺铂诱发肾损害的同时可引起脂质过氧化产的OD值。物含量增多、抗氧化酶活性下降等。基于此，2．4SchB抗顺铂细胞损伤作用的浓度测定设本研究对五味子乙素对顺铂致HK-2细胞损伤的保10组，测定方法同“2．3”。护作用及其相关机制进行了探讨，以期为减轻顺铂2．5SchB对HK-2细胞形态的影响设3组(正收稿日期：2014—02—03，修回日期：2014—03—24常细胞对照组、J1{

8、$13组和SchB保护组)。将HK一2基金项目：浙江省教育厅课题(NoY201225849)；浙江省科技厅重大接种在6孔板中，培养至对数生长期后，分别加入不专项(No2009C03012-5)含血清的DMEM／F12培养基、顺铂20p~mol·L。。和作者简介：王嫣虹(1985一)，女，硕士，药师，研究方向：中药药理学混合药液20m0l-L。SchB+20p．mol·L顺铂各及毒理学，E-mail：285758506@qq．corn；徐翔(1968一)，男，硕士，副主任药师，研究方向：临床2ml