多种方法提取苎麻组织基因组DNA的质量比较-论文.pdf

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1、第53卷第11期湖北农业科学Vo1．53No．112014年6月HubeiAgriculturalSciencesJun．，2014多种方法提取苎麻组织基因组DNA的质量比较张平，夏东升，蔡亚君，曾庆福，王军(武汉纺织大学纺织印染清洁生产教育部工程研究中心．武汉430073)摘要：以苎麻[Boehmerianivea(L_)GaLldich．1的纤维成熟期韧皮组织、种子和根组织为试验材料，采用CTAB法、SDS法和尿素法提取苎麻基因组DNA。3种DNA提取方法比较，CTAB法提取的DNA质量优于其他两种方法；3种试验材料比较，韧皮组织提取的DNA质量最好．其次是种子和根组织、种子提取

2、的DNA浓度最高。设计梯度试验分析不同研磨时间对韧皮组织和种子总DNA提取质量的影响．结果显示韧皮组织研磨4min、种子研磨6min提取的总DNA质量较好．关键词：苎麻[Boehmerianivea(L．)Gaudich．]；基因组DNA；提取；组织；CTAB法；SDS法：尿素法中图分类号：R281．4；Q7文献标识码：A文章编号：0439—8l14(2014)11-2682—04ComparisonoftheGenomicDNAExtractionMethodsFromDiferentRamieTissuesZHANGPing，XIADong-sheng，CAIYa-jan，ZEN

3、GQing-fu，WANGJun(EngineeringResearchCenterforCleanerProductionofTextileDyingandprintingUnderMinistryofEducationWuhanTextileUniversity，Wuhan430073，China)Abatract：ExtractionofhighqualitygenomicDNAfromRamietissueisthefoundationforthestudyofmolecularbiologyoframie．Inordertostudyramiegenomebysomemol

4、eculartest，suehasPCR，Inthisstudy，CTAB，SDSandureamethodswereusedtoextracttheramiegenomicDNAfromthephloemtissueoframiefibermaturephase，seedandroottissuerespectively．TheDNAextractioneffectofthreedifferenttissuesandmethodswerecomparedbyultravioletspeetrophotometryandagaroseelectroforesis．Theresults

5、showedthattheextractionefectofCTABmethodisbestthantheothertw(1mpthod：theextractioneffeetofthephloemtissueoframiefibermaturephaseisbestinthreedifierenttissues．followbytheseedandroottissue．TheseediSabletoextracthighquantitygenomicDNAinthreeextractionmethods．Inadditionwestudydifferentmillingtimeof

6、thephloemtissueandseedstototalDNAaualityeffectbyusedCTABandSOSmethods．fheresultsshowedthatthephloemtissuegrindingfor4min，seedtissuegrindingfor6minutescangethighqualityDNA．Keywords：Boehmerianivea(L．)Gaudich．；ramiegenomieDNA；extraction；tissues；CTABmethods；SDSmethod；ureamethod苎麻【Boehmerianivea(L．)

7、Gaudich．1是中国样的基因组DNA提取方法[2]目前，常用的有十六特有的传统纤维作物，其纤维具有吸湿散热快、透烷基三乙基溴化铵(CTAB)法]、十二烷基磺酸钠气好、不贴身、抗菌、挺括美观等优点，具有“天然纤(SDS)法、尿素法_5等。每种DNA提取和纯化方法维之王”的美誉。现有的中国苎麻品种纤维细度比的原理基本相同，均包括破碎细胞、释放DNA、去除较粗、刚度大，因此迫切需要选育低结晶度、低取向杂质、分离DNA等一系列步骤。植物组织中含有蛋度、高纤维支