TMZ的建立及其耐药机制的研究-论文.pdf

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1、临床神经外科杂志2013年第1O卷第6期353·doi：10．3969／j．issn．1672-7770．2013．06．012论著·人脑胶质瘤耐药细胞系SKMG．1／TMZ的建立及其耐药机制的研究李晓兴，马建华，季海明，刘艺春，王之敏【摘要】目的建立对替莫唑胺(TMZ)耐药的胶质瘤细胞系并初步对其耐药机制进行探讨。方法通过体外分阶段递增药物浓度诱导法使SKMG一1细胞对TMZ产生耐药性；采用细胞集落形成实验及Mrrr法检测SKMG一1／TMZ细胞对TMZ的耐药性；采用RT-PCR检测SKMG．1／TMZ细胞中MGMTmRNA表达情况。结果细胞集落形

2、成相对率显示，SKMG一1／TMZ一6细胞形成相当率是未诱导组SKMG一1细胞的4～11倍；MTr法检测显示SKMG一1／TMZ对TMZ的耐药指数为5．8；RT—PCR检测显示SKMG．1／TMZ细胞中MGMTmRNA表达上调，并可扩增出571bp的特异性片段。结论通过分步诱导法在体外建立了一株对TMZ耐药的细胞系SKMG-1／TMZ，MGMTmRNA表达上调是其对TMZ产生耐药的机制之一。【关键词】替莫唑胺；胶质瘤；耐药性【中图分类号】R739．4【文献标识码】A【文章编号】1672-7770(2013)06-0353-04Establishmen

3、tofdrug-resistancecelllineofhumanglioma-SKMG-1／TMZandexploreitsresistancemechanismsLiXiao—xing，MaJian—hua，JiHal—ming，eta1．DepartmentofNeurosurgery，TaixingPeople’SHospitalAffiliatedtoYangzhouUniversity，Taixing225400，ChinaAbstract：ObjectiveToestablishadrug—resistancecel1lineofhum

4、angliomawithtemozolomide(TMZ)andtoexploreitsdrug—resistancemechanisms．MethodsChemotherapeuticresistanceinSKMG．1humangliomacellswasinducedbythestepwiserevulsionwithTMZ．TheresistanceindexandthecellcloningexperimentwereassayedbyUsingtheRT—PCRassayedtheexpressionofMGMTmRNAinSKMG-1／

5、TMZ．ResultsAsubline·SKMG一1／TMZwasestablished．Thecellcloningexperimentdemonstratedthatthecolony-formingefficiencyofSKMG-·1／TMZ-6cellsinducedstep—wiselyinTMZwas4～11foldsthatofSKMG一1cellswithoutinducement，SKMG-1／TMZshowedabout5．8foldresistancetoTMZassayedbyMTFmethod．Meanwhile，RT—P

6、CRresultshowedthatSKMG．1／TMZcellsexpressedup．regulatedMGMTmRNAwhichcouldbeamplificatedoutfora571·bpspecificfragment．ConclusionAdrug—resistancecelllineofhumangliomaisestablishedbythestepwiserevulsionwithTMZandMGMTplayedaveryimportantroleinthedrug-resistanceacquiredbySKMG-1cellto

7、TMZ．Keyword：temozolomide；glioma；drug-resistance替莫唑胺(TMZ)对顽固性多形性成胶质细胞低MGMT的活性可增强其抗瘤效果。因此，探讨胶瘤的成年患者有显著的抗肿瘤作用，然而自TMZ应质瘤的耐药机制，对于临床上提高胶质瘤的化疗效用于临床治疗脑胶质瘤以来，国外已有研究表果有重要意义。本研究以TMZ作为诱导剂，通过分明_l，其对胶质瘤的临床显效率不足45％。有研步递增药物浓度诱导法使人脑胶质瘤SKMG．1细胞究认为J，胶质瘤细胞中06甲基鸟嘌呤．DNA甲基产生耐药性，并对其耐药机制进行研究分析。转移酶(06-m

8、ethylguanine—DNAmethyltransferase，1材料和方法MGMT)的活性与其对TMZ