野牛草基因组DNA提取方法的筛选.pdf

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1、一26一江苏农业科学2014年第42卷第8期张晓波，许沛东，赵艳．野牛草基因组DNA提取方法的筛选[J]．江苏农业科学，2014，42(8)：26—28野牛草基因组DNA提取方法的筛选张晓波，许沛东，赵艳(海南大学农学院，海南海口570228)摘要：采用十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)法、十二烷基磺酸钠(SDS)法以及高盐法3种方法对野牛草叶片的基因组DNA进行提取，并利用分光光度计和琼脂糖凝胶电泳检测比较3种方法提取DNA的纯度与浓度。结果表明，3种方法提取到的野牛草叶片DNA的纯度、完整性都较好，质量从高到低依次为CTAB法>高盐法>SDS法，产率依

2、次为SDS法>CTAB法>高盐法，综合来看CTAB法是提取野牛草基因组DNA的最佳方法。关键词：野牛草；DNA提取；CTAB法；SDS法；高盐法中图分类号：S688．403文献标志码：A文章编号：1002—1302(2014)08—0026—03野牛草是广泛种植于我国西北、华北及东北地区的暖季界l3个贫水国之一的国家来说，收集优质草坪种质材料，型草坪草，在20世纪50年代初由中科院胡淑良先生从美国对其生物学特征及遗传多样性进行分析鉴定研究，筛选具有引进。野牛草耐旱性强，在年降水量300—600mm的干观赏价值和节水环保作用的草坪品种，有着广泛的应用前景旱

3、、半干旱地区也可以正常生长，在持续干旱2～3个月的夏和现实意义的。关于植物基因组DNA提取方法，国内外都有季生长状况依旧良好。野牛草喜pH值为6．1—8．0的黏质一定的研究，包括高粱等作物”、红掌等花卉以及狗牙根土壤，但在高原丘陵瘠薄土壤上也可顽强生长；野牛草具有较等草坪草。本试验结合国内外相关研究，参考Staub等强的耐寒性，在我国北方大部分地区都可越冬，甚至在西北、的研究方法，针对野牛草的特性，如叶片纤维含量高，具东北的寒冷地带一39。c的低温条件下也可以正常越冬。有绒毛、韧性高的特点，对适合基因组DNA提取的十六烷基由于野牛草良好的抗逆性，应用广泛

4、，对其研究也越来越多，三甲基溴化铵(CTAB)法、十二烷基磺酸钠(SDS)法、高盐法但主要集中在品种选育”和抗逆性的研究方面，而3种方法进行比较，筛选出最佳方法。旨在为野牛草未来的对野牛草基因组DNA的研究相对较少。然而，对于我国这个遗传多样性研究提供一定的参考，同时也为适应我国城市绿水资源平均占有量不足世界平均水平1／4，被联合国列入世化以及西部生态环境建设的需要，培育适合我国国情的环保型耐旱草坪植物奠定一定的基础。收稿13期：2013—11—11基金项目：海南大学青年基金(编号：qnjj1149)。1材料与方法作喜草坪管理謦相关研究。一E一m男ail

5、，：山a~西gia岢oo岚@人126，博．co士rn，。副教授，主要从事1“．1试验材料’通信作者：赵艳。E一il：yanbo315@126．。。供试材料为中国农业科学院畜牧研究所培育的野牛草品1个漆酶cDNA全长基因和基因组DNA全长序列，这对于今1755一l763．后研究漆酶基因的同源表达、异源表达及蛋白质的纯化奠定[5]XiaoYZ，ChenQ，HangJ，eta1．Selectiveinduction，purificationand了基础。利用SEFA—PCR技术在红平菇菌株中克隆1个漆characterizationofalaceaseisoz

6、ymefromthebasidiomyeeteTrametes酶5启动子序列，这对于今后研究红平菇漆酶的表达调控具8p．AI-I28—2[J]．Mycologia，2010，96(1)：26—35．[6]MarzlufGA．GeneticregulationofNitrogenmetabolisminthefungi有十分重要的意义。[J]．MicrobiologicalReviews，1997，61(1)：17—32．参考文献：[7]陈军，高大文，池玉杰，等．偏肿拟栓菌Pseudotrametesgibbosa产漆酶的条件优化[J]．菌物学报，2008

7、，27(6)：940—946．[1]BaldfianP．Fungallaecases—occurrenceandproperties[J]．FEMS[8]“uYG，ChenYL．High—efficiencythermal勰ymmetricinterlacedMicrobiologyReviews，2006，30(2)：215—242．[2]FaracoV，GiardinaP，SanniaG．Metal—responsiveelementsinPleu—PCRforamplificationofunknownflankingsequences[J]．Bi

8、otech—rotusostreatuslaccasegenepromoters