细胞周期检测点激酶1小干扰RNA干扰表达载体体内对顺铂诱导的食管癌移植瘤细胞生长、凋亡的影响.pdf

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1、·788·中华实验外科杂志2Ol4年4月第31卷第4期ChinJExpSurg，April2014，Vo

2、．31，No．4·实验研究·细胞周期检测点激酶1小干扰RNA干扰表达载体体内对顺铂诱导的食管癌移植瘤细胞生长、凋亡的影响孙森淼孙玉生张明智张威于庆凯陈奎生【摘要】目的构建裸鼠食管癌移植瘤模型，观察细胞周期检测点激酶1(Chk1)小干扰RNA(siRNA)干扰表达载体xCJJl~ft诱导的食管癌移植瘤细胞生物学行为的影响。方法分组饲养荷瘤裸鼠。A组：对照组，瘤体注射无菌生理盐水；B组：瘤体注射Chk

3、lsiRNA2加浓度为(5mg／kg)的顺铂；C组：瘤体注射顺铂(5mg／kg)。观察各组移植瘤的生长；采用免疫组织化学、原位杂交方法检测各组移植瘤组织中Chkl蛋白和mRNA的表达；运用原位缺口末端标记(TUNEL)检测各组细胞凋。结果B组[(279．11±27．23)mm]移植瘤体积明显小于c组l(512．414-35．18)mm]及A组[(907．824-58．09)mIn]，组问两两比较差异均有统计学意义(P<0．01)；B组移植瘤组织中Chkl蛋Et(26．87±5．31)及mRNA(45．

4、29±6．47)表达明低于C组(蛋白：56．80±7．00；mRNA：87．514-8．38)及A组(蛋白：98．23±15．67；mRNA：l87．234-18．55)，组间两两比较差异均有统计学意义(P<0．05)；B组细胞中凋亡指数[(21．03±1．35)％]明显高于c组[(12．41±1．23)％]及A组[(1．344-0．12)％]，组问两两比较差异均有统计学意义(P<0．05)。结论沉默Chkl表达，可体内增强顺铂对裸鼠食管癌移植瘤生长抑制，诱导移植瘤细胞凋亡的效应。【关键词】食管鳞癌；

5、检验点激酶1；顺铂；裸鼠移植瘤Theefectofcheckpointkinase1smallinterferingRNAoncisplatininducedesophagealcarcinomatransplantedtumorcellsbiologicalbehaviorinvivoSunMiaomiao，SunYusheng，ZhangMing—zhi，Zhang，YuQingkai，ChenKuisheng．DepartmentofPathology，HenanTumorHospital，Zh

6、eng-zhou450003．C^inaCorrespondingauthor：ChenKuisheng，Email：chenksh2002@163．con【Abstract】0hjectiveConstructingthenudemouseesophagealcancertransplantedtumormodel，toobservetheeffectofcheckpointkinasel(Chk1)smallinterferingRNA(siRNA)interferenceexpres—sionv

7、ectorofcisplatininducedesophagealcarcinomatransplantedtumorcellsbiologicalbehaviornvivo．MethodsGroupbreedingtumor—burdenednudemouse，namelyAgroups：injectionSterileSaline；Bgroup：injectionChklsiRNAaddcisplatin(5mg／kg)，Cgroups：injectioncisplatin(5mg／kg)．Obs

8、ervingthetransplantationtumorgrowth，usingimmunohistochemiealtotesttheproteinexpressionofChklinthetumortissues，usinginsituhybridizationtotestthemRNAexpressionofChklinthetumortissues，usingrdT—mediateddUTPnickendlabeling(TUNEL)methodtotesttheapoptosissitua

9、tionoftumortissues．Re．suitsThevolui~eoftransplantedtumorintheBgroup(279．11±27．23)inn,i31wasnoticeablylesschanthatintheCgroup[(512．414-35．18)mm]andAgroup[(907．824-58．09)mnl]，therewereastatisti—caldifierenceamongthreegroups(P<0．01)