rna干扰aurora a表达对人子宫内膜癌细胞的生长与细胞周期的影响

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1、RNA干扰AuroraA表达对人子宫内膜癌细胞的生长与细胞周期的影响作者：滑芳单位：石家庄市，河北医科大学第一医院妇产科【摘要】目的探讨应用RNA干扰技术抑制AuroraA基因表达，并研究AuroraA基因表达下调对人子宫内膜癌细胞生长和细胞周期分布的影响。方法用RNA干扰法抑制AuroraA的蛋白表达，RTPCR及Westernblot方法检测AuroraAmRNA和蛋白表达,流式细胞仪检测细胞周期分布的变化,四氮唑盐法(MTT)检测转染前后细胞生长抑制率变化。结果siRNAAuroraA可明显降低AuroraAmRNA和蛋白的表达,siRNAA

2、uroraA导入Ishikawa细胞48h后,细胞的生长被抑制，细胞周期阻滞于G2/M期和S期；细胞的凋亡率明显升高。结论下调AuroraA表达可抑制人子宫内膜癌细胞系Ishikawa的增殖,同时导致细胞阻滞于G2/M期及S期并且促进细胞凋亡。【关键词】AuroraA激酶子宫内膜癌Ishikawa细胞　　TheeffectofsiRNAAuroraAoncellgrowthandcellcycleinhumanendometrialcarcinomacellinvitroHUAFang,ZHANGHongzhen，FANGGuiying,etal.D

3、epartmentofGynecologyandObstetrics,TheFirstHospitalofHeibeiMedicalUniversity,Shijiazhuang050031【Abstract】ObjectiveToaddressthepossibilityofAuroraAkinasasatherapeutictargetforendometrialcarcinoma,weemployedsiRNAtechniquetoinhibitAuroraAexpressionandinvestegateitseffectontumorgro

4、wthandcellcycleofIshikawacell.MethodsOligosiRNAofAuroraAwassynthesizedandtransfectedintoIshikawacells.AuroraAmRNAexpressionandproteincontentwereexaminedbyreversetranscriptionpolymerasechainreaction(RTPCR)andWesternblotrespectively.Cellcycleandapoptosisdistributionwereobservedb

5、yflowcytometer.MTTassaywasusedtoevaluatecellinhibitionratiobeforeandaftertransfection.ResultsTheauroraAmRNAexpressionandproteincontentsignificantlydecreasedbysiRNAofAuroraA.TheproliferationoftheIshikawacellswasinhibitedbysiRNAofAuroraA,alongwiththeinductionofaccumulationofcells

6、inSphaseandtheG2/Mtransitionandincreasedcellapoptosis.ConclusionInhibitionofAuroraAexpressioncanresultinthesuppressionofcellgrowthandG2/Marrestofhumanendometrialcarcinomacellinvitro.【Keywords】AuroraAkinase;endometrialcarcinoma;Ishikawacell子宫内膜癌是女性生殖系统三大恶性肿瘤之一,约占女性癌症总数7%,占女性生殖道恶

7、性肿瘤20%～30%,近年来子宫内膜癌在世界范围内发病率有上升趋势。在某些欧美国家子宫内膜癌发病率已居女性生殖道恶性肿瘤首位，其发病机制一直倍受关注。AuroraA是一种丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶,其编码基因定位于人类染色体20q1312～1313;在中心体的成熟、纺锤体的建立及染色体的正常分离过程以及胞质分裂等细胞周期不同阶段的各种事件中都起到了至关重要的作用。自从被发现以来,大量的研究均提示AuroraA激酶与多种人类恶性肿瘤的发生、发展密切相关［1］,是近年来一个极具前途的肿瘤分子靶向治疗的靶点。RNA干扰(RNAinterference，RNAi

8、)是由双链RNA(doublestrandedRNA，dsRNA)引发的转录后基因沉默机制，目前已成功用于