rna干扰生存素基因表达对肺腺癌细胞增殖及凋亡的影响

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1、2013年第17卷第24期实用临床医药杂志JournalofClinicalMedicineinPractice·45·RNA干扰生存素基因表达对肺腺癌细胞增殖及凋亡的影响郑一鸣，贾卫光，王鹏程，焦霞，朱晓蔚，戴桂红，蒋小芹，肖蔚，于鸿(江苏省泰州市人民医院，1．心胸外科；2．病理科，江苏泰州，225000)摘要：目的采用RNA干扰技术探讨生存素(survivin)对人肺腺癌细胞增殖及凋亡的影响及其可能的分子机制。方法采用脂质体介导将pGCsi—shsurvivin与pGCsi质粒转染人肺腺癌细胞株A

2、549，经G418筛选获得稳定抑制survivin表达的肺腺癌细胞模型；Westernblot检测转染细胞survivin、p21、鼠双微体基因2(MDM2)蛋白表达；M，丌比色法检测阳性细胞克隆的增殖活性；流式细胞仪检测各组细胞凋亡。结果成功构建稳定抑制survivin表达的肺腺癌细胞模型。与对照组相比，反义组p21表达及细胞凋亡率显著增加，而MDM2表达及细胞增殖显著降低。结论下调A549细胞survivin表达后，细胞增殖降低而细胞凋亡增加，其作用机制与p21表达增加和MDM2降低有关。关键词：

3、RNA干扰；生存素；鼠双微体基因2；细胞凋亡中图分类号：R734．2文献标志码：A文章编号：1672-2353(2013)24-045-03DOI：10．7619／jcmp．201324013InfluenceofRNA——interferedsurvivingeneexpressiononproliferationandapoptosisofhumanlungadenocarcinomacellsZHENGYiming‘JIAWeiguang。，WANGPengcheng，JIAOXia，ZHUXi

4、aowei，，DAIGuihong，JIANGXiaoqin，XIAOWei，YUHong(1．DepartmentofCardiothoracicSurgery；2．DepartmentofPathology，Ta~houPeopleSHospital，TaizhOU，Jiangsu，225300)ABSTRACT：ObjectiveToexploretheinfluenceofRNA—interferedsurvivinontheprolifera—tionandapoptosisofhumanl

5、ungadenocarcinomacellsanditspossiblemechanism．MethodspGCsi——shsurvivinandpGCsiplasmidsweretransfeetedintohumanlungadenocarcinomaA549cells．Theproteinexpressionofsurvivin，p21andMDM2weredetectedbyWesternblot．ThecellproliferationandapoptosiswereobservedbyMq

6、Tassayandflowcytomertry．ResultsSurvivin—inhibitedadeno-carcinomacellmodelsweresuccessfullyestablished．Comparedwiththecontrolgroup，theexpressionofp21andapoptosisrateincreasedsignificantlyinpGCsi—shsurvivintransfectedgroup，whiletheMDM2expressionandcellpro

7、liferationreducedsignificantly．ConclusionAfterdownregulationofsurvivinexpressionofA549cells，thecellsproliferationreduceandcellsapoptosisincrease，andrelat—edmechanismmaybeassociatedwithincreasingexpressionofp21andreductionofMDM2．KEYWORDS：RNAinterference；

8、survivin；murinedoubleminutegene2；cellapoptosis生存素(survivin)基因属于凋亡抑制蛋白家常组织中不表达。大量研究显示，生存素不族成员，也是迄今为止发现的最强的凋亡抑制因仅具有抑制细胞凋亡、调节细胞增殖及促进血管子，广泛表达于人类各种恶性肿瘤，但在大多数正形成等功能，而且其表达水平与多种恶性肿瘤的收稿日期：2013—06—22基金项目：江苏省“333工程”培养资金资助项目(200924)；江苏省自然科学基