小分子干扰RNA下调星形细胞上调基因1表达对肝癌细胞增殖和凋亡的影响-论文.pdf

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1、·982·中华实验外科杂志2014年5月第31卷第5期ChinJExpSurg，May2014，Vo1．3l，N0．5·实验研究·小分子干扰RNA下调星形细胞上调基因1表达对肝癌细胞增殖和凋亡的影响王宏伟段长虹秦瑞英李伟伟侯丽娟段树鹏申保生郝洁杨玉新【摘要】目的探讨小分子干扰RNA(siRNA)下调星形细胞上调基因1(AEG—1)表达对肝癌细胞增殖和凋亡的影响及其机制。方法用设计合成的AEG一1siRNA转染人肝癌细胞HepG2细胞株，实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(FQ—PCR)技术检测HepG2细胞AEG一1mRNA的表达；噻唑蓝(MTr)法检测HepG2细胞的增殖；

2、流式细胞术检测AEG—lsiRNA对HepG2细胞凋亡和细胞周期的影响。结果AEG．1siRNA组AEG一1mRNA表达(0．43±0．04)明显低于空白对照组(0．96±0．09)和阴性对照组(0．94±0．08)(P<0．01)；培养72h后AEG—lsiRNA组HepG2细胞吸光度(A)值(1．25±0．08)明显低于空白对照组(2．644-0．14)和阴性对照组(2．494-0．14，P<0．O1)；AEG一1siRNA组HepG2细胞凋亡率(19．24-3．8)％明显高于空白对照组(5．34-1．4)％和阴性对照组(5．64-1．6)％(P<0．01)；AEG一

3、1siRNA组HepG2细胞在DNA合成前期(Go／G．期)细胞比率[(61．38±2．31)％]明显高于空白对照组[(41．244-1．97)％]和阴性对照组[(42．154-1．64)％，P<0．01]，而在合成期(S)[(25．364-1．21)％]及合成后期(G／M)[(13．26±0．97)％]分别低于空白对照组[(33．604-1．24)％、(25．164-0．79)％]和阴性对照组[(32．524-1．23)％、(25．33±0．86)％，P<0．01]。结论siRNA可通过下调HepG2细胞AEG一1基因的表达，抑制HepG2细胞的增殖，并促进其凋亡。【关

4、键词】星形细胞上调基因1；肝癌；小干扰RNA；细胞凋亡Efectofdown-regulationofastrocyteelevatedgene·-1expressionbysmallinterferingRNAinhibitscellproliferationandinducesapoptosisinhumanhepat0celIularcarcinomaHepG2cellsWangHongwei，DuanChanghong，QinRuiying，LiWeiwei，HouL~uan，DuanShupeng，ShenBaosheng，HaoJie，YangYuxin．De

5、partmentofInfectionDiseases，theFirstAffiliatedHospitalofXinxiangMedicalUniver—sity，Weihui453100，ChinaCorrespondingauthor：WangHongwei，Email：relanglO0@aliyun．com【Abstract】ObjectiveToinvestigatetheeffectofsmallinterferingRNA(siRNA)一inducedastro—cyteelevatedgene一1(AEG一1)down—regulationonthepr

6、oliferation，apoptosisandcellcycleofhumanhep—atocellularcarcinomacellsanditsmechanism．MethodssiRNAandAEG一1siRNAweretransfectedtoHumanhepatocellularcarcinomaHepG2ceils．respectively．TheexpressionofAEG一1mRNAwasdetectedbyrea1．timefluorescentquantitativereversetranscription—polymerasechainreact

7、ion(FQ—PCR)．Thecellproliferationwasdetectedbymethylthiazoltetrazolium(MTF)method．Theapoptosisandcellcyclewereanalyzedbyflowcytometry．ResultsExpressionofAEG一1mRNAinAEG一1siRNAgroup(0．43±0．04)wassignificantlylowerthanthatincontrolsiRNAgroup(0．944-0．08)andcontrolgroup(0