大豆异黄酮对乳腺癌细胞抑癌基因启动子区的去甲基化作用研究-论文.pdf

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1、中闱计划生育学杂志2014年6月第22卷第6期ChinJFamPlann，Vo1．22，No．6，June201438l●基础研究●大豆异黄酮对乳腺癌细胞抑癌基因启动子区的去甲基化作用研究崔熠金孝华胡玮柏珊珊马旭1．圈家人L1汁生委科学技术研究所遗传研究室(北京，100081)；2．北京协和医学院研究生院摘要目的：探讨大豆异黄酮是否能够逆转乳腺癌细胞中关键抑癌基因一上皮型钙粘蛋白基因(E—cadherin)启动子的异常L}1基化状态，并有效地重新激活该基因的表达，从而抑制乳腺肿瘤细胞生长。方法：采用不同浓度大豆异黄酮处理乳腺癌SKBR3细胞6d

2、后，通过噻唑蓝比色法检测大豆异黄酮x~-~L腺癌细胞增殖的影响，进而通过甲基化特异性聚合酶链反应结合半定量PCR方法，检测乳腺癌细胞中E—cadherin基因启动子区CpG岛的去甲基化状态及恢复表达情况。结果：大豆异黄酮在10，20，40，80，160／xmol／I浓度对乳腺癌细胞的抑制率分别为(7±2．11)Vo，(10土3．23)。(44．33±4．93)，(84．33±3．06)，(86．33±3．51)，其对细胞的生长抑制呈剂量依赖效应。甲基化特异性PCR及半定PCR结果提示大豆异黄酮对E—cadherin基因启动子区异常甲基化具有去甲

3、基化效应，并能使E—cadherin基部分恢复表达。结论：植物雌激素大豆异黄酮作为一种天然的表观遗传修饰剂能够通过逆转关键抑癌基闪启动子甲基化，激活抑癌基因，抑制乳腺癌细胞的生长，在乳腺肿瘤的预防和治疗中发挥重要作用。关键词植物雌激素大豆异黄酮上皮型钙粘蛋白甲基化乳腺癌抑癌基因表观遗传doi：10．3969／i．issn．1004—8189．2014．O6Reactivationofmethylation-silencedtumorsuppressorgeneE—cadherinbygenisteininhumanbreastcancercel

4、lsCUIYi。，．IlNXiao—hua，HUWei。，BAIShan—shan，MAXu1．ReproductiveandGeneticCenterofNationalResearchInstituteforF&milyPlanning，Beijing100081；2．Depart—mentofGenetics，PekingUnionMedicalCollegeCorrespondingauthor：MAXu，Email：genetic@263．net．cnAbstractObjective：Toexplorewhetherthegenis

5、teinmayreactivatemethylationsilencedE—cadheringeneinhumanbreastcancercellsandtheninhibitthegrowthofbreastcancercells．Methods：After6daysofexposuretovariouscon—centrationsofgenistein(10，20，50，100／,M)，theeffectsofgenisteinonthegrowthofSKBR3cellsweremeasuredbytheMTTassay．TheCpGi

6、slandmethylationstatusofE—cadherinwasanalyzedbymethylation—specificPCR(MSP)．AndtheexpressionlevelofE—cadherinmRNAwasdetectedbyreversetranscriptase—PCR(RT-PCR)．Results：TheMTTresultsindicatedthatgenisteinsubstantiallyinhibitedthegrowthofhumanbreastcarcinomacellsinadose—。de—_pe

7、ndentmanner．Theinhibitoryratesofdifferenttreatedgroup(IOt~M，20tiM，40M，80／~M，16OM)were(7±2．11)，(10±3．23)，(44．33±4．93)Y0，(84．33±3．06)，(86．33±3．51)，respectively．MSPandRT—PCRresultsindicatedthatgenisteinreversedSKBR3CpGislandhypermethylationandrestoreditstranscriptioninSKBR3cell

8、lines．Conclusion：Theresultssuggestthatgenisteinmayserveasnaturaleffectiveep