6种水蛭的coⅰ、12s rrna和16s rrna基因及分子进化分析

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1、第3O卷第6期生物学杂志V01．30No．62013年12月J0URNALOFBIOLOGYDec，2013doi：10．3969／j．issn．2095—1736．2013．06．0106种水蛭的COI、12SrRNA和16SrRNA基因及分子进化分析徐云玲，聂晶，肖凌(1．湖北省食品药品监督检验研究院，武汉430064；2．湖北中医药大学，武汉430065)摘要：水蛭是一种常见的传统中药，为了解常见蛭类细胞色素氧化酶亚基I(COI)、12SrRNA和16SrRNA基因特征和水蛭分子系统进化关系。对常用的入药品种El本

2、医蛭(Hirtdonipponia)、宽体金线蛭(Whitmaniapigra)、尖细金线蛭(Whitmaniaacranulate)和相近物种菲牛蛭(Poecilobdellamanillensis)、光润金线蛭(Whitmanialaevis)及八目石蛭(Erpobdellaoctoculata)的COI、12SrRNA和16SrRNA基因进行扩增、测序，利用Mega5．0分析基因特征、颠换率、分化年代，利用PAUP4．10b和MrBayes3．1．2构建分子系统树。结果表明6种水蛭的COI、12SrRNA和16Sr

3、RNA基因全长分别为1534～1536bp、709—744bp、1129～1173bp，GC含量分别为32．35％一34．79％、24．42％～28．49％、24．82％～27．02％，总体颠换率为0．002％一0．760％，分化年代为3．55×10a～9．85×10。a；每种水蛭为单系群的支持值均t>82。说明COI、12SrRNA和16SrRNA基因具有种间特异性，可用于6种水蛭的分类鉴别。关键词：水蛭；COI；12SrRNA；16SrRNA；分子进化中图分类号：Q78文献标识码：A文章编号：2095—1736(20

4、13)06—0010—04MolecularevolutionanalysisofCOI，12SrRNAand16SrRNAgeneinsixspeciesofleechxuYun．1ing一，NIEJing，XIAOLing，(1．HubeiInstituteforFoodandDrugControl，Wuhan430064；2．HubeiUniversityofChineseMedicine，Wuhan430065，China)Abstract：Toinvestigatetherelationshipbetweenc

5、ytoehromeoxidasesubunitI(COI)，12SrRNAand16SrRNAgenetraitsandmolecularevolutionofleech，genesofcytoehromeoxidasesubunitI(COI)，12SrRNAand16SrRNAfrom／／／rudonipponia，Poeci—lobdellamanillensis，Whitmaniapigra，Whitmaniaacranulate，WhitmanialaevisandErpobdeUaoctoculatawere

6、amplifiedandse—quenced．Genetraits．transversionratesanddivergencetimeswereanalyzed．MolecularphylogenetictreesweregeneratedusingPAUP4．1ObandMrBayes3．1．2．ThecompleteCO，12SrRNAand16SrRNAgeneswere1534bpto1536bp，709bpto744bpand1129bpto1173bp，GCcontentswere32．35％to34．79

7、％，24．42％to28．49％and24．82％to27．02％．respectively．Transver—sionrateswere0．002％to0．760％．Divergencetimeswerefrom3．55×10ato9．85×10a．Eachspeciesofleechshowedhighsup—portforamonophyleticgroup(BPP≥82)．ConstructedCOI，12SrRNAand16SrRNAgeneshadspeciesspecificityandcanbeusedf

8、ortheidentificationofthesixspeciesofleech．Keywords：leech；COIgene；12SrRNAgene；16SrRNAgene；molecularevolution水蛭种质资源的分类是水蛭药材物质活性成分研局限性。线粒体DNA(mtDNA)细胞色素氧化酶亚究的基础，传