置换色谱法分离纯化大豆磷脂的研究-论文.pdf

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1、Vo1．21，2014，No．4食品科技置换色谱法分离纯化大豆磷脂的研究郭涛丰益(上海)生物技术研发中心有限公司(上海200137)摘要：采用置换色谱法分离纯化了大豆磷脂，研究表明：以二氯甲烷一甲醇为流动相、置换剂选择10乙醇胺、流速0．5mL／min、上样量为110mg，在此置换条件下，获得的PE、PC、PI含量可进一步富集，分别为从52．9、8．7、30增长至78．8、45．3、84％，其回收率分别为48．4、81．6、65．9％。关键词：大豆磷脂；置换色谱；分离纯化中图分类号：TS229文献标识码：A文章编号：1672—5026(2【)14

2、)04—075—04SeparationandpurificationofsoybeanphospholipidbydisplacementchromatographyGUOTaoWilmarBiotechnologyResearch&DevelopmentCenter(Shanghai)Co．，Ltd．(Shanghai200137)Abstract：Thesoybeanphospholipidwasseparatedandpurifiedbydisplacementchromatog—raphy．Resultsshowthattakingdi

3、chloromethane—methanolasmobilephase，10ethanola—mineasdisplacingagent，0．5mL／minastheflowrate，110mgasthesamplevolume，inthisre—placementcondition，obtainedPE，PC，PIcontentcanbefurtherenriched，respectivelyfrom52．9，8．7％，30growthto78．8，45．3，84，therecoveryrateis48．49／5，81．6，65．9．Keywo

4、rds：soybeanphospholipid；displacementchromatography；separationandpurification置换色谱是一种非线性色谱技术，一个分离周时，分离过程完成随着HPLC技术的不断发展和高期包括色谱柱的平衡、上样、置换和再生4个步骤。效色谱填料的深入研究，置换色谱在生物分子分离色谱柱经流动相平衡后上样，因为选用的流动相洗纯化方面的应用研究越来越多口]。脱能力很弱，样品仅仅停留在色谱柱上端，并使该处天然磷脂是含磷酸的类脂化合物，广泛存在于的固定相吸附饱和。再通过泵注入置换剂进行置换植物、动物及微生物

5、体中，在工业生产、食品科学、医分离，选用的置换剂与固定相的作用应比样品中任药学、生命科学等研究方面都有重要的应用，而对磷何组分与固定相的作用力都强，在它的推动下样品脂进行分离、提纯则是各种研究的前提和关键]。中各组分将按照与固定相作用强弱的顺序，逐步形磷脂分离、提纯的方法多样：薄层色谱法(TLC)，利成一系列相毗邻的纯物质带即置换序列[1]。如果条用磷脂各组分在展开剂与薄层板上的吸附剂之间作件满足，置换序列形成后将在置换剂的推动下以相用力大小的不同，则比移值不同，从而达到分离磷脂同的速度向前移动。当置换剂前沿抵达色谱柱出口组分的目的，薄层色谱法具

6、有操作方便、设备简单、结果直观等优点，缺点是对点样技术和实验室条件收稿日期：2014—04—08要求较高，测量结果的重现性欠佳；高效液相色谱法作者简介：郭涛，男，1983年出生，硕士，工程师，主要从事油脂加工工艺方面的研究。(HPLC)，利用各类磷脂间极性头所带官能团和电75食品科技郭涛：置换色谱法分离纯化大豆磷脂的研究荷的差异，采用正相色谱模式加以分离，是当前主要处理后的乙醇不溶物为样品，在置换色谱柱上等度分析方法，但具有溶剂消耗大、固定相利用率低、产洗脱，控制流速为3mL／min，每10min收集1次，物的产率低等缺点]。而置换色谱不仅可以克

7、服收集液经HPLC法定性检测，200min以确定收集上述问题还具有样品负载量大，产品浓度高，拖尾液中是否含有磷脂。小，固定相利用率高等特点，更适合用于制备分离。1．3．3置换剂的选择以选定的流动相为溶剂，将候选的置换剂(甘1材料与方法油、乙醇胺)分别配成一定浓度的溶液，以预处理后1．1材料与试剂的乙醇不溶物为样品，置换分离，流速控制为大豆油脚，上海嘉里食品有限公司；100～0．5mL／min，每隔一定时间收集流出物，收集液经200目层析硅胶、薄层层析硅胶，青岛海洋化工有限HPLC法定性检测，以确定收集液中是否含有磷脂。公司；羧甲基纤维素钠、二氯甲

8、烷、无水甲醇、无水乙1．3．4柱色谱分离纯化醇、95乙醇、氯仿、乙醚、甘油、乙醇胺、丙酮、碘，国用流动相平衡色谱柱，待系统平衡后，关闭平