毕业设计(论文)-高效液相色谱法对样品的分离与纯化

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1、高效液相色谱法对样品A的分离与纯化目录摘要IAbstractII引言1第1章绪论21.1高效液相色谱简介21.1.1正相色谱和反相色谱21.1.2制备色谱的概况31.2高效液相色谱柱选择与使用61.2.1色谱分离模式的选择61.2.2制备型高效液相色谱柱7第2章样品中杂质的分离与纯化92.1实验仪器92.2实验试剂92.3实验步骤9第3章结果与讨论18结论19致谢20参考文献21高效液相色谱法对样品A的分离与纯化摘要:高效液相色谱作为一种重要的分析方法,广泛的应用于化学和生物化学中、医药品、化学、环保、生命科学和食品工业的

2、研究上。本论文采用反相高效制备液相色谱对样品A进行了分离,纯化和制备。在样品的制备过程中,对流动相、洗脱梯度、进样量、色谱柱的种类等制备条件进行了优化。优化出制备条件后,使用制备型高效液相色谱对样品进行分离纯化,收集大量样品目标峰的馏分,进行减压蒸馏和冷冻干燥后,得到干燥的样品。经LC-MS检测,其纯度仅有89.733%。通过对液相色谱分离条件的再次优化,经过多次的制备分离,对样品进行富集。经LC-MS检测,最终纯度达到了100%。该方法操作简单,方便,安全性强,污染性小,检测限低。关键词:高效液相色谱反相分离制备21Se

3、parationandPurificationofCompoundAbyHighPerformanceLiquidChromatographyAbstract:Highperformanceliquidchromatographyasanimportantanalyticalmethod,widelyusedinchemicalandbiochemical,medicine,chemical,environmentalprotection,lifesciences,andfoodindustryresearch.Thesa

4、mpleswereseparated,purifiedandpreparedbyreversedphasehighperformanceliquidchromatography.Inthepreparationofthesample,thepreparationmethodwasscreened,includingthemobilephase,theelutiongradient,theinjectionvolume,thetypeofcolumnandsoon.Afterthepreparationconditionsw

5、ereoptimized,thesampleswereseparatedandpurifiedbypreparativehighperformanceliquidchromatography,andthefractionsofthetargetpeakswerecollected.Aftervacuumdistillationandfreezedrying,thedriedsampleswereobtained.Thepuritywasonly89.733%byLC-MSanalyze.Thesamplewasenrich

6、edbyre-optimizationoftheseparationconditionsoftheliquidchromatographyandbyseveralpreparativeseparations.ByLC-MSdetection,thefinalpurityis100%.Themethodissimple,convenient,highsafety,lesspollution,lowdetectionlimit.Keywords:highperformanceliquidchromatography;rever

7、sephase;separation;preparation21引言制备型高效色谱是利用“吸附-洗脱”的原理进行分离纯化。在国外已有多年的发展,而在我国只是在20世纪90年代末期才渐渐开始普及。近年来,随着生物化学,有机化学,制药行业等相关行业的快速发展,制备型高效液相色谱已经越来越广泛的被应用在相关项目和产品的产业化之中。随着高效液相色谱的快速发展,出现了各种新的色谱技术。其中,反相高效液相色谱因其分离效果好,选择性高等优点,已成为分离纯化天然产物的重要方法。一般的高效液相色谱在分离样品的过程中,由于色谱技术的限制,导致

8、色谱柱固定相上的载体流失。反相高效液相色谱是为了解决这一问题而发展出来的一种新型分离技术。反相液相色谱技术是将有机官能团和烷基硅胶载体表面的游离羟基通过化学反应键合而成。化学键合固定相对各种极性溶剂都有良好的化学稳定性和热稳定性。由学键合固定相制备的反相液相色谱柱具有分离效果好,使用时间长,重现性好,对

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