凝胶色谱法分离纯化棉籽低聚糖和蛋白-论文.pdf

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1、第28卷第3期高校化学工程学报No．3、，0I．282Ol4年6月JournalofChemicalEngineeringofChineseUniversitiesJune2O14文章编号：1003·9015(2014)03·0503-07凝胶色谱法分离纯化棉籽低聚糖和蛋白刘聪，鲍宗必，邢华斌，杨亦文，苏宝根，任其龙(浙江大学生物质化工教育部重点实验室，浙江大学化学工程与生物工程学系，浙江杭州310027)摘要：棉籽低聚糖是一种功能性低聚糖，可应用于食品、化妆品、医疗等方面。目前，棉籽低聚糖与蛋白的分离是最大的技术难点之一。作者研究了棉籽

2、低聚糖和蛋白的凝胶色谱法分离。以棉籽糖和牛血清白蛋白混合溶液为原料，采用SephdexG．10、SephdexLH．20和ToyopearlHW-40C三种不同凝胶制嵛柱为固定相，考察了凝胶种类、温度、流动相组成、进样浓度等因素对分离的影响，确定了适宜的工艺操作条件：以去离子水为流动相，HW-40C凝胶为固定相，柱温40~C，上样浓度100mg．mL一，进样体积1mL，流速为1．82Bv．h～。在该工艺条件下，脱脂棉粕提取液经凝胶色谱分离可得到纯度达89．1％的棉籽糖，收率为64．8％。本方法具有操作简便，分离效率高，产品质量好，为棉籽低

3、聚糖和棉籽蛋白的制各研究提供了一种新的方法。关键词：凝胶色谱法：低聚糖；蛋白；HW-40C凝胶；棉籽糖；牛血清白蛋白中图分类号：TQ464．1文献标识码：ADOh10．3969~．issn．1003·9015．2014．03．0llSeparationandPurificationofRafinoseandProteinsbyGelPermeationChromatographyLIUCong，BAOZong—bi，XINGHua-bin，YANGYi—wen，SUBao—gen，RENQi—long(KeyLaboratoryofBio

4、massChemicalEngineeringofMinistryofEducation，DepartmentofChemicalandBiologicalEngineering，ZhejiangUniversity,Hangzhou310027，China)Abstract：RafinoseiSafunctionaloligosaccharidethatcanbeusedinfood．cosmeticsandorgantransplantengineering．Currently,theseparationofraffinoseandp

5、roteinsisaproblem．GelpermeationchromatographywasusedtoseparateraffinoseandBSA，andfactorssuchasgelpackingtype，temperature，mobilephasecompositionandfeedconcentrationwereinvestigated．AnoptimizedchromatographicconditionwasusingToyopearlHW-40Casthestationaryphaseanddeionizedwa

6、terasthemobilephasewithaflowrateof1．82BV·h～．Moreover,theprocesswasoperatedat40。Cwithfeedconcentrationsupto100mg·mL～．Araffinoserecoveryof64．8％andpurityof89．1％areobtainedfromrafinoseextractundersuchconditions．Thismethodissimpleandefectiveinremovingplantproteinsforoligosacch

7、aridepurification．Keywords：gelpermeationchromatography；oligosaccharide；protein；HW-40Cgel；raffinose；BullSerumAlbumin1前言低聚糖作为一种新型的功能性糖源，具有低热量、促进有益菌生长、提高免疫力、抗氧化、抑制腐败菌生长等多种生理功能】，可应用于保健品、食品、医疗、化妆品等【。川1。目前，国内最常见的方法是从来源丰富的天然产物中提取得到低聚糖[12~15】。在低聚糖生产制备中，低聚糖与蛋白的分离是目前存在的最大技术难题之一，这是因

8、为在低聚糖提取过程中，植物蛋白随之一起浸出，在后续的低聚糖结晶收稿日期：2013-01．24；修订日期：2013。03．14。基金项目：国家“十二五”科技支撑计划项目(2011BAD23B03