曼地亚红豆杉细胞悬浮培养体系的建立-论文.pdf

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1、第42卷第1期西北农林科技大学学报(自然科学版)VoL42NO．12014年1月JournalofNorthwestA＆FUniversity(Nat．Sci．Ed．)Jan．2014网络出版时间：2013—12—2511：05DOI：10．13207／j．cnki．jnwafu．2014．O1．021网络出版地址：http：／／www．cnki．net／kcms／doi／10．13207／j．cnki．jnwafu．2014．01．021．html曼地亚红豆杉细胞悬浮培养体系的建立赵继鹏，杨淑慎(西北农林科技大学生命科学学院

2、，陕西杨凌712100)[摘要]【目的】建立曼地亚红豆杉的愈伤组织细胞悬浮培养体系，为紫杉醇生产提供参考。【方法】以曼地亚红豆杉幼茎诱导的愈伤组织为材料，以B5培养基为基本培养基，利用单因素试验或正交试验，研究愈伤组织接种量、蔗糖质量浓度、激素类型及配比和防褐化试剂对曼地亚红豆杉细胞生长的影响。【结果】曼地亚红豆杉细胞悬浮培养的最佳培养基和培养条件为：B5+2，4一D0．6mg／L+NAA0．8rng／L．4-KT1．0mg／L．4-柠檬酸220mg／L4-PVP350mg／L+水解乳蛋白450mg／L．4-蔗糖30g／L(p

3、H一5．8)，接种量0．1g／mL，在培养箱中110r／min、25℃暗培养。【结论】曼地亚红豆杉愈伤组织细胞在所建立的培养体系中经过多次继代后，生长状况良好，表明该细胞悬浮体系比较稳定，可以用于大规模培养红豆杉细胞。[关键词]曼地亚红豆杉；愈伤组织；细胞悬浮培养；植物生长激素；防褐化试剂[中图分类号]Q813．11[文献标志码]A[文章编号]16719387(2014)01—0189—07EstablishmentofcellsuspensionculturesystemforTaxusmediaZHAOji—peng，YA

4、NGShu—shen(CollegeofLifeScience，NorthwestA&FUniversity，Yangling，Shaanxi712100，China)Abstract：【0bjective]ThisstudyaimedtoestablishasuspensionculturesystemforTaxusmediacellSOastoimprovetheproductionoftaxo1．[MethodlThecalluswasextractedfromstemsofyoungTaxusmedia．Effect

5、sofsugar，callusinoculumsize，phytohormonesandanti—browningreagentsonthegrowthofcellswerestudiedbyorthogonaltestdesignwithbasicmediumB5．[Result]ThebestculturingmediumforTaxusmediacellswasB5+2，4-D0．6mg／I+NAA0．8mg／L+KT1．0mg／L+citricacid220mg／I+PVP350mg／L+LH450mg／L+sucro

6、se30g／L(pH一5．8)．Thebestculturingconditionswere：Inoculumsize0．1g／mL，incubatorrotationspeed110r／min，temperature25℃，andindarkenvironment．[Conclu—sionlCellsgrewwellintheproposedculturingsystem，indicatingthatthestablecellsuspensionsystemwassuitableforlarge—scalecultivati

7、onofTaxuscells．Keywords：Taxusmedia；callus；cellsuspensioncultures；plantgrowthhormone；anti—browningreagent紫杉醇(Taxo1)是存在于红豆杉科红豆杉属植场需求。物中的一种四环二萜酰胺类化合物，经临床证明，其曼地亚红豆杉(Taxusmedia)是东北红豆杉与对治疗卵巢癌、肺癌等多种癌症有特效，市场需求量欧洲红豆杉的天然杂交品种。该植物枝叶茂盛，生日益增加Ⅲ。但由于其药源植物红豆杉生长缓慢，长速度快，对环境适应能力强，能在多种气候

8、和土壤且紫杉醇含量极低(0．01～0．020A)，无法满足市条件下生长，且树皮和枝叶中均含有紫杉醇(O．04％[收稿日期]2013一o128[基金项目]陕西省教育厅资助项目(017K107)；陕西省科学技术研究发展计划项目(2009K01—11)[作者简介]赵继鹏(1987一