海南粗榧细胞悬浮培养体系的建立

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1、硕士学位论文题目：海南粗榧细胞悬浮培养体系的建立作者：陈林指导教师：李永成副教授、谭望桥高级工程师类另专业艰专业：食品工程时间：二〇一五年五月EstablishmentofCephalotaxuscellsuspensionculturesystemforCephalotaxusmanniiAThesisSubmittedinPartial.FulfillmentoftheRequirementFortheMasterDegreeinFoodEngineeringBySupervisor:^Maj。海南大学学位论文原创性声明和使用授权说明原创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导

2、师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外，本论文不含任何其他个人或集体已经发表或撰写过的作品或成果。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本声明的法律结果由本人承担。论文作者签名：曰期：年、月巧曰学位论文版权使用授权说明本人完全了解海南大学关于收集、保存、使用学位论文的规定，即：学校有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅。本人授权海南大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存和汇编本学位论文。保密论文在解密后遵守此规定。论文作者签名：导师签名：

3、曰期：月曰曰期：《年月曰本人已经认真阅读“高校学位论文全文数据库发布章程”，同意将本人的学位论文提交“高校学位论文全文数据库”中全文发布，并可按“章程”中规定享受相关权益。同意论文提交后滞后：口半年：□一年：二年发布。论文作者签名导师签名：曰期：七年士月曰曰期：年月曰摘要以海南粗榧嫩叶诱导的愈伤组织为材料，在液体培养基中培养，得到均匀分散的海南粗榧悬浮细胞。本文主要围绕海南粗榧悬浮细胞培养体系的建立，海南粗榧细胞生长、产物合成及基质消耗的动力学进行分析；渗透压调节剂对海南粗榧细胞生长及三尖杉酯类碱合成的影响，主要研究结果如下：、考察了悬浮培养体系中基本培养基、维生素、蔗糖浓度、激素配比、、

4、接种量对海南粗榧细胞悬浮培养体系建立的影响，并利用检测海南粗榧悬浮细胞和培养基中生物碱的含量，最佳培养条件为以为基本培养基、接种量（鲜重细胞），添加维生素、蔗糖，外源激素配比为初始调至，且发酵过程中每调节培养基值至对细胞生长和产物合成有促进作用。、海南粗榧悬浮细胞生长曲线在合适条件下基本符合“型曲线，细胞生长周期为，在细胞生长过程中为滞后期，为对数生长期，为稳定期，产物合成在增长缓慢，主要进行初级代谢，为细胞的进一步分裂、增殖做准备，基本保持不变，海南粗榧悬浮细胞最适收获时间为山糖消耗呈倒”曲线，其消耗进程与细胞生长的各时期基本吻合；按盐在培养的前消耗速度明显快于硝酸盐，之后铵盐浓度缓慢下

5、降，硝酸盐浓度消耗速度较快；磷酸盐在细胞生长的延滞期即被快速的消耗完；细胞活力总体呈现先上升后下降趋势。、研宄了不同种类、浓度的渗透压调节剂在各生长时期对海南粗榧细胞生长与三尖杉酯类碱合成的影响，结果显示，在细胞生长的对数期添加的甘露醇促进了细胞的生长和产物的合成。关键词：海南粗榧；愈伤组织；悬浮培养；三尖杉酯类碱AbstractUsingtiiecallusfromtenderleafofC.manniiforfluidsuspensioncultivation，、，，，，，、“”，，，“”，，、目录目录引言海南粗榧研宄进展海南粗榧资源概况化学成分及药理作用海南粗榧开发利用现状植物细胞培

6、养研究概况植物细胞培养特点提高植物细胞悬浮培养中次级代谢产物方法外植体的影响培养条件的优化培养基的影响外源激素的影响接种量的影响的影响添加诱导子添加前体物质添加代谢抑制剂培养方式固定化培养技术两步培养技术毛状根培养技术反义技术三尖杉酯碱与高三尖杉酯碱国内外研究概况三尖杉酯碱与高三尖杉酯碱化学结构及理化性质三尖杉酯碱与高三尖杉酯碱的抗癌机理三尖杉酯碱与高三尖杉酯碱的合成研宄1.4.3.1生物合成研宄化学合成研究细胞培养研宄本研宄的目的、意义及主要内容材料与方法继材料植物细胞主要试剂主要仪器培养基海南粗榧悬浮细胞培养方法试验断海南粗榧细胞悬浮培养条件的优化基本培养对海南粗榧细胞生长与三尖杉酯类

7、碱合成的影响维生素对海南粗榧细胞生长与三尖杉酯类碱合成的影响蔗糖浓度对海南粗榧细胞生长与三尖杉酯类碱合成的影响接种量对海南粗榧细胞生长与三尖杉酯类碱合成的影响对海南粗榧细胞生长与三尖杉酯类碱合成的影响激素配比对海南粗榧细胞生长与三尖杉酯类碱合成的影响滲透压调节剂对海南粗榧细胞生长与三尖杉酯类碱合成的影响试验分析方法海南粗榧悬浮细胞生长的测定培养液的测定培养基中糖含量的测定标准曲线的绘制培养液中蔗糖浓度的测定培养基中浓度的