奶山羊胎儿成纤维细胞系的建立及其生物学特性分析-论文.pdf

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1、2015年4月甘肃农业大学学报第50卷第2期16~20JOURNALOFGANSUAGRICULTURALUNIVERSITY双月刊奶山羊胎儿成纤维细胞系的建立及其生物学特性分析马呈瑞，常卫华，曹会萍，张改平。，卢清侠。，张勇L(1．甘肃农业大学动物医学院，甘肃兰州730070；2．甘肃农业大学生命科学技术学院，甘肃兰州730070；3．河南省农业科学院农业部动物免疫学重点开放实验室，河南郑州450002)摘要：试验分别采用组织块贴壁法和消化分离法对奶山羊胎儿成纤维细胞进行体外培养，通过原代培养、细胞传代、冷

2、冻保存等成功建立了奶山羊胎儿成纤维细胞系，并对该细胞系进行了形态学观察、生长动力学分析、细胞活力测定、核型分析和微生物检测等多种生物学特性分析．结果表明：成纤维细胞原代培养采用贴块培养时所需时间较长，消化培养有较多死细胞；传代细胞生长情况良好，群体倍增时间(PDT)约为4o．4h；生长总体趋势呈“s’’型；冻存后活力为92．3％，生长状况与冻存前一致；细胞染色体中二倍体(2一60)占主体；细菌、真菌和支原体检测结果均为阴性，细胞系的各项指标均达到ATCC细胞系鉴定标准．关键词：奶山羊；成纤维细胞系；细胞培养；

3、生物学特性中图分类号：S827文献标志码：A文章编号：1003—4315(2015)02—0016—05EstablishmentoffibroblastcelllineanditsbiologicalcharacteristicsindairygoatfetusMACheng-rui，CHANGWei—hua，CAOHui—ping。，ZHANGGai—ping。，LUQinxia。，ZHANGYong，。(1．CollegeofVeterinaryMedicine，GansuAgriculturalUni

4、versity，Lanzhou730070，China；2．CollegeofScienceand，Technology，GansuAgriculturalUniversity，Lanzhou730070，China；3．KeyLaboratoryofAnimalImmunology，MinistryofAgriculture,HenanAcademyofAgriculturalSciences，Zhengzhou450002，China)Abstract：Thepri‘marycellsofdairygoa

5、tfetuswereobtainedbymethodsoftissuecultureandcollage—nasedissociation，thenusingthemethodofprimaryculture，serialsubcultivationandcryopreservationweestablighedadairygoatfetusfibroblast。celllinesuccessfully．Themorphologicalobservations，dynamicgrowthanalysis，de

6、terminationofviability，karyotypeanalysis，microorganismtestwerealldonetostudythebiologicalcharacteristicsofthecellline．Theresultsshowedthatprimaryculturewithexplantsneededmoretime，whileculturewithtrypsinizationhadmoredeadceils．Thepassagecellgrowthingoodcondi

7、—tion，thepopulationdoublingtime(PDT)ofcellswasapproximatelyreachedto40．4h．Cellgrowthtend—encypresentedas‘S’curve．Thecellviabilitywas92．3afteranabiosisandandmaintainedthesamegrowthcondition．Analysisofchromosomalkaryotypeindicatedthatdiploid(2===60)holdapredo

8、minanceplaceinthecellline．Thedetection：resultsofthebacteria，fungusandmycoplasmatawereallnegative．Ev—eryindexinthecelllinemetallthestandardqualitycontrolsofATCC．ItiSvaluabletoprovidethedesira一第一作者：马呈瑞(1