大豆CONSTANS同源基因的克隆及表达-论文.pdf

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1、中国油料作物学报2014，36(2)：142—149ChineseJournalofOilCropSciencesdoi：10．7505／j．issn．1007—9084．2014．02．002大豆CONSTANS同源基因的克隆及表达纳小凡，简波，，吴存祥，侯文胜，蒋炳军，韩天富(1．中国农业科学院作物科学研究所／农业部北京大豆生物学重点实验室，北京100081；2．宁夏大学生命科学学院，宁夏银川，750021；3．挪威科技大学，特隆赫姆挪威，7491)摘要：CONSTANS(CO)是调控拟南芥由营养生长向生殖生长转换的关键基因。本研究利用RACE法从晚

2、熟(光周期敏感)大豆品种自贡冬豆中克隆得3个大豆cD同源基因，分别为GlymaO4go6240、Glymal3gO1290和Gly-maO6go6300。电子克隆法检索发现另外5个同源性较高的基因，这些基因均含一个内含子，其编码氨基酸序列与拟南芥AtCO的B—box和CCT功能结构域高度同源。qRT—PCR分析叶片中GlymaO4go6240、GlymaO6go6300和Glyma13go1290的表达发现，短日下三者表达均呈现昼夜节律模式，表现为白天降低，夜间积累，凌晨达到表达高峰；长日处理仅影响了这些基因在夜间的积累量。此外，GlymaO6gO630

3、0和Glyma13go1290在大豆叶片、茎尖、花及嫩荚中有大量表达。短日处理时Glymal3go1290的表达在自贡冬豆由营养生长向生殖生长转化的过程中逐渐增加，而长日处理至13d后其表达逐渐被抑制，表明Glyma13go1290可能参与自贡冬豆开花的调控。关键词：大豆；CO同源基因；克隆；开花；自贡冬豆中图分类号：$529，$565．103文献标识码：A文章编号：1007—9084(2014)02—0142—08CloningandexpressionofCONSTANShomologsinsoybeancultivarZigongdongdouNA

4、Xiao—fan，，JIANBo'，WUCun—xiang，HOUWen—sheng，JIANGBing—jun，HANTian—fu(1．MOAKeyLaboratoryofSoybeanBiology(Beijing)，InstituteofCropSciences，ChineseAcademyofAgriculturalSciences，Beng100081，China；2．Ningxiauniversity，Yinchuan750021China；，3．NorwegianUniversityofScienceandTechnology，Trond

5、heim7491，Norway)Abstract：CONSTANS(CO)actsinthenucleustopromotethetransitionfromvegetativegrowthtofloweringinArabidopsis，whileitshomologsarepresentinmanyotherplantspeciesregardlessofthetypeofphotoperiodicre—sponse．Inthisstudy，wecloned3COhomologgenesfromalate—maturing(photoperiod—s

6、ensitive)soybeancu1．tivar。ZigongdongdouusingRLM—RACE．Thenweidentified5additionalCOhomologsbyblastingthesoybeandraftgenome(http：／／www．phytozome．org)．The8genesallconsistof2exonsand1intron．Theyhaddistinct3’一and5’一UTRsfromeachother．suggestingthattheirtranscriptionalandpost—transcript

7、ionalregulationcouldbedifferent．／nsilicoanalysisfoundthatall8COhomologscontainahighlyconservedB—boxdomainandCCTdo．main，whichindicatedthattheyfunctionedsimilarlytoAtCO．Theidentitypercentageofpredictedaminoacidse-quenceofthe8COhomologsrangedfrom39％forGlyma04g06240to51％forGlyma19g05

8、170andGly—real3g07030．whencomparedwithAt