大豆Usp1基因的克隆和表达分析-论文.pdf

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1、第31卷第4期大豆科学VoI．3lNO．42012年8月SOYBEANSCIENCEAug．2012大豆Vspl基因的克隆和表达分析黄姗，王伟旗，侯文胜(中国农业科学院作物科学研究所，国家农作物基因资源与基因改良重大科学工程，农业部北京大豆生物学重点实验室，北京100081)摘要：在对大豆根系盐胁迫抑制差减杂交文库EST序列分析的基础上，利用RT—PCR技术克隆得到了一个大豆一基因，命名为GmUspl，其编码一个包含164个氨基酸残基的多肽链。多序列比对和编码蛋白结构分析表明，GmUspl属于泛应激蛋白(UniversalStressProtein)家族成员之一。其氨基酸序列

2、与蚕豆VLenodl8序列相似度最高，属于MJ-0577类中含有ATP结合位点的UspA亚族，与MJ-0577有相似的蛋白二级结构。分别采用250mmol·LNaC1、100I,zmol·LABA和30％PEG6000进行胁迫处理，耐盐品种文丰7号和盐敏感品种Union的GmUspl均被诱导表达，二者对胁迫诱导响应时间和表达量存在差异，说明GmUspl可能参与大豆对非生物逆境胁迫的应答调控。关键词：大豆；；序列分析；基因表达中图分类号：$565．1文献标识码：A文章编号：1000—9841(2012)04-0546-06CloningandExpressionAnalysis

3、ofUsp1GenefromSoybeanHUANGShan，WANGWei—qi，HOUWen—sheng(MOAKeyLaboratoryofSoybeanBiology，NationalKeyFacilityforCropGeneResourcesandGeneticImprovement，InstituteofCropScience，ChineseAcademyofAgncuhuralSciences，Beijing100081，China)Abstract：AccordingtotheESTsequencesoftheSuppressionSubtractiveHy

4、bridization(SSH)cDNAlibraries，asoybeanVspagenenamedbyGmUsplwasclonedfromthesoybeanbyRT—PCR．ThecompletecDNAofGmUsplwas1047bp，itencodedapeptidewhichcontained164aminoacidresidues．The495bpCDSshowedthatitbelongedtotheuniversalstressprotein(Us—pA)family，byusingtheBLASTptoolofNCBIdatabase．Homology

5、analysisshowedGmUsplhadthehi【ghentsimilaritywiththebeanVfenodl8，anditbelongedtothegroupofVspa，whichrepresentedbytheATP—bingingstructureoftheMJ-0577protein_fromMethanococcusjannaschii．ItalsohadthesimilarproteinsecondarystructurewithMJ-0577．InthesaltsensitivevarietyU—nionandtolerantvarietyWen

6、fengNo．7，theexpressionofGmUsplwasinducedby250mmol·L～NaC1，100p~mol·LABAand30％PEG一600treatment，however，ithaddifferentresponsetimeandexpressionleve1．SoGmUw1mightbeinvolvedinplantstressadaptation，itsuggestedthatGmUsplmayplayaroleinsaltstressadaptationinsoybean．Keywords：Soybean；WpA；Sequenceanaly

7、sis；Geneexpression泛应激蛋白(Universalstressprotein，UspA)是Escherichiacoli的UspA家族蛋白。David等分一类在细胞质中普遍存在的小分子蛋白，通常由析了拟南芥基因组44个UspA家族蛋白，认为拟南l11—167个氨基酸残基组成。UspA最早在大肠杆芥中的该家族蛋白全部由近似于1MJH(MJ0577)的菌中发现，其表达受多种胁迫影响。研究表明该类祖先演变而来。蛋白在碳、氮、磷、硫酸盐、氨基酸等缺乏时，以及在大豆是世界上重要的粮油兼用作物，具有